• 快讯 结核分枝杆菌对低水平利福平耐药性和rpoB突变:纽约地区全基因组测序和药敏试验数据分析

    来源专题:结核病防治
    编译者:蒋君
    发布时间:2021-04-12
    快速、可靠地检测利福平(RIF)耐药性对耐药性和耐多药性(MDR)结核病的诊断和治疗至关重要。不一致的RIF表型/基因型易感性结果仍然是一个挑战,因为rpoB突变的存在并不能带来高水平的RIF耐药性,如Ser450Leu等突变株所显示的那样。与完全敏感菌株相比,这些菌株被称为低水平RIF耐药菌株,表现出较高的RIF MICs,但通过分枝杆菌生长指示管(MGIT)检测仍表现出表型敏感性,并与患者预后不良相关。研究人员通过全基因组测序(WGS)在一组1779株前瞻性试验菌株中评估RIF耐药性预测,包括rpoB基因突变的流行率和表型,作为2.5年内常规临床试验的一部分。在此期间,发现139株菌株具有非同义rpoB突变,其中53株与RIF耐药相关,包括低水平和高水平耐药。43株(81.1%)菌株对RIF(MGIT为1.0μg/ml)产生了耐药性。其余10株(18.9%)对MGIT敏感,但通过MIC检测证实为低水平RIF耐药性。完整的rpoB基因测序克服了临界浓度分型、探针分型和部分基因测序方法的局限性。通用的临床WGS与同时的表型测试提供了对rpoB患病率和类型更完整的了解 突变及其与纽约RIF耐药性的关系。同时进行表型检测的通用临床WGS提供了对纽约rpoB突变的流行率和类型及其与RIF耐药性的关联的更全面的了解。
  • 快讯 磷脂酰肌醇甘露糖苷酰基转移酶PatA是结核分枝杆菌体内和体外生长所必不可少的

    来源专题:结核病防治
    编译者:蒋君
    发布时间:2021-04-08
    结核分枝杆菌由一种不寻常的细胞膜组成,它由独特的脂类和聚糖控制,对亲水性药物具有渗透性屏障,是其生存和毒性的关键。磷脂酰肌醇甘露糖苷(PIMs)是一种糖脂,不仅是细胞膜的关键结构成分,而且是脂甘露聚糖(LM)和脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)的前体糖脂,是与宿主-病原体相互作用有关的重要脂聚糖。研究人员重点研究PatA,一种膜相关酰基转移酶,它将棕榈酰基部分从棕榈酰辅酶A转移到甘露糖环的6位,该位置与PIM1/PIM2中肌醇的2位相连。研究人员验证了PatA在体内和体外对结核分枝杆菌的作用,构建了一个patA条件突变株,并证明patA在批培养中具有杀菌作用。这种表型与分枝杆菌内膜的重要结构成分Ac1PIM2水平显著降低有关。在巨噬细胞感染和小鼠感染模型中也证实了PatA对生存能力的要求,其中在PatA基因沉默后观察到存活细胞数显著减少。这让人想起PimA的行为,它是启动PIM途径的甘露糖基转移酶,也被发现是结核分枝杆菌在体内和体外生长所必需的。总之,实验数据强调了PIM生物合成途径的早期步骤对结核分枝杆菌生理学的重要性,并揭示了PatA是针对这一主要人类病原体的药物发现计划的新靶点。 结核病(TB)是单一传染源导致死亡的主要原因。结核分枝杆菌菌株中耐药性的出现,强调需要确定新的靶点和抗菌药物。分枝杆菌的细胞膜是导致这种耐药性的主要因素。研究人员重点研究了PIMs的生物合成、关键毒力因子和细胞膜的重要组成部分。具体来说,研究人员已经确定PatA,在结核分枝杆菌中是必需的。这些结果强调了PIM生物合成途径早期步骤对分枝杆菌生理学的重要性以及PatA作为潜在新药靶点的适用性。
  • 快讯 用薄层琼脂对埃斯瓦蒂尼地区进行直接表型药敏试验,可快速检测出结核分枝杆菌的生长和利福平耐药性,否则会被世卫组织认可的诊断试验遗漏

    来源专题:结核病防治
    编译者:蒋君
    发布时间:2021-03-29
    Xpert®MTB/RIF能快速检测出对利福平(RR)的耐药性,但该检测漏掉了导致rpoB突变的I491F-RR,这种突变在南部非洲很常见。此外,Xpert®MTB/RIF不能区分活结核分枝杆菌和死结核分枝杆菌。 研究人员探讨薄层琼脂(TLA)直接药敏试验(DST)检测埃斯瓦蒂尼地区结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性能力。连续样本与Xpert®MTB/RIF和TLA并行检测利福平(1.0μg/ml)和氧氟沙星(2.0μg/ml)。在安特卫普的参考实验室,将TLA结果与Löwenstein-Jensen或7H11固体培养基上的间接DST以及其他表型和基因型检测进行比较,以解决不一致性。 TLA对MTB检测阳性率为7.1%,而对Xpert®MTB/RIF的阳性率为10.0%。在研究的4547个样本中,有200个菌株可用于与复合参考品进行比较。在中位数18.4天之内,TLA检测RR的敏感性为93.0%(CI-77.4-98.0),特异性为99.4%(CI 96.7-99.9),而Xpert®MTB/RIF的敏感性为62.5%(CI 42.7-78.8),特异性为99.3%(CI 96.2-99.9)。其中8株(占所有RR确诊分离株的28.6%)携带I491F突变,均由TLA检测到。TLA还正确鉴定了184株氧氟沙星S分离株中的183株(99.5%特异性,CI 97.0-99.9)。 综上所述,在野外条件下,TLA可快速检测RR,在这种特殊情况下,有助于检测Xpert®MTB/RIF以外的其他RR患者,这主要但不唯一地归因于I491F。TLA还可准确排除氟喹诺酮类药物的耐药性。
  • 快讯 坦桑尼亚耐多药结核病患者中不同治疗方案的分子细菌载量测定对分枝杆菌的杀菌效果

    来源专题:结核病防治
    编译者:蒋君
    发布时间:2021-03-25
    利福平或耐多药结核病(RR/MDR-TB)的治疗已基本过渡到不含注射用氨基糖苷类成分的治疗方案,尽管该类药物在治疗早期具有杀菌活性。研究人员测试了结核分子细菌负荷试验(TB-MBLA)测定的结核分枝杆菌在sputa中的杀伤率是否与RR/MDR-TB方案的组成相关。在第0、3、7和14天收集RR/MDR-和药物敏感结核患者的连续痰,然后每月进行4个月的抗结核治疗。用TB-MBLA定量测定痰中结核分枝杆菌16srRNA的活菌数,估算每毫升菌落形成单位(eCFU/ml)。采用重复测量的非线性混合效应模型比较不同方案的结核分枝杆菌杀灭率。37例患者共产生296个连续痰液,治疗方法如下:13例患者接受无贝达奎林注射液对照方案,9例患者接受含贝达奎林注射液方案,8例患者接受全口服贝达奎林方案,用利福平/异烟肼/吡嗪酰胺/乙胺丁醇(RHZE)治疗7例药物敏感性肺结核。与注射用无贝达喹啉对照方案调整后的结核分枝杆菌杀灭率−0.17(95% CI为−0.23至−0.12)相比,注射用含贝达喹啉方案的杀灭率为−0.62(95% CI为−1.05至−0.20)log10 eCFU/ml(P = 0.019),-0.35(95% CI为-0.65至-0.13)log10 eCFU/ml(全口服贝达喹啉方案)(P = 0.054),和-0.29(95% CI为-0.78至+0.22)log10 eCFU/ml(RHZE方案)(P = 0.332)。因此,在接受贝达喹啉治疗的患者中,sputa对结核分枝杆菌的杀灭率更高,但通过添加注射用氨基糖苷类药物,结核分枝杆菌的杀灭率进一步提高。
  • 快讯 小剂量丁胺卡那霉素治疗耐多药结核病

    来源专题:结核病防治
    编译者:蒋君
    发布时间:2021-03-19
    世界卫生组织建议静脉注射丁胺卡那霉素(又称阿米卡星)治疗耐多药结核病,剂量为15毫克/千克。然而,高剂量与明显的毒性有关。 在研究机构治疗的耐多药结核病患者接受丁胺卡那霉素治疗,剂量为8–10毫克/千克,并根据治疗药物监测进行剂量调整。研究人员对2010年至2016年间接受丁胺卡那霉素治疗的耐多药结核病患者进行了一项回顾性队列研究。 49名患者被纳入研究。丁胺卡那霉素的中位起始剂量为8.9毫克/千克(IQR 8,10),目标治疗药物水平在中位治疗期12天达到(IQR 5,26)。丁胺卡那霉素治疗的中位持续时间为7.2个月(IQR 5.7,8),痰培养转化的中位时间为1个月(IQR 1,2)。根据正式的听力测试,6名患者(12.2%)出现听力下降(95%可信区间4.6–24.8%);22.2%的患者出现主观听力损失(95%可信区间11.2–37.1%)和31.9%的主观耳鸣(95%可信区间19.1–47.1%)。10名患者(23%)血清肌酐显著升高(95%CI 11.8–38.6%),但只有5名患者在治疗结束时GFR<60。84%的患者有治疗成功(95%可信区间84–99%)。 综上所述,小剂量丁胺卡那霉素与氨基糖苷类药物不良事件发生率相对较低有关。研究人员假设在a组和B组药物无法建立适当的治疗方案的情况下,小剂量丁胺卡那霉素可以作为一种安全有效的治疗耐多药结核病的方法,以及在对不良事件进行仔细监测是可行的。