我们描述了使用现有的基于发光的ATPlite试剂进行自动化，基于细胞和高通量的筛选试验的开发，优化和验证，以鉴定抑制肠道病毒复制的抗病毒化合物。 通过测量抗病毒化合物pleconaril和rupintrivir保护免受病毒致细胞病变效应（CPE）的细胞中的ATP水平来确定抗病毒效力。 基于CPE的测定条件在5000个细胞/孔的细胞密度和384孔板中的100CCID50的病毒感染剂量下进行优化。 该试验表现出优异的稳健性，当测试在中国流行的三种肠道病毒A71分离株时，Z'因子值在0.75和0.82之间，变异系数在0.33％和1.45％之间，信号与背景比率在6.92至22.6之间。 该试验也适用于筛选其他小核糖核酸病毒，例如脊髓灰质炎病毒，柯萨奇病毒，埃可病毒和鼠疫病毒。
