《解析棉铃虫效应子PPI5调控植物防御的分子机制》

  • 来源专题:生物育种
  • 编译者: 季雪婧
  • 发布时间:2024-10-29
  •     棉花是重要的战略物资,我国棉花种植业产值1500亿,棉纺织全产业链1.2万亿,是我国的支柱产业之一。棉花常年种植面积4500万亩,87%的面积在新疆,涉及4000多万人就业,对边疆稳定、经济发展意义重大。棉花虫害多达30余种,常年造成200亿元以上的经济损失。棉铃虫是一种广泛分布的多食性害虫。由于它的杂食性、迁徙力和高繁殖力,棉铃虫已经入侵了亚洲、非洲和欧洲等多个国家。这种昆虫能够以100多种不同的植物为食,对作物造成重大经济损失,估计价值超过20亿美元。Bt抗虫棉部分实现对棉铃虫的防控,但Bt抗性逐渐下降,次级害虫上升为主要害虫,至今没有有效的控制办法。我国抗虫棉研发滞后,主要原因是缺乏突破性抗虫基因以及遗传工程技术创新不足。阐明棉花抗虫机制发掘新基因、开发基因工程新工具具有重要意义,是我国抗虫棉升级的必由途径。

        2024年10月1日,华中农业大学棉花遗传改良团队在Advanced Science杂志在线发表了题为“Cotton bollworm (H. armigera) effector PPI5 targets FKBP17-2 to inhibit ER immunity and JA/SA responses, enhancing insect feeding”的研究论文,文章解析了棉铃虫效应子PPI5靶向FKBP17-2抑制内质网免疫和JA/SA响应,促进昆虫取食的分子机制。

        本研究收集了以棉花叶片为食的棉铃虫的口腔分泌物(OSs),并进行了蛋白质组学分析,共筛选出19个候选基因。利用烟草瞬时表达系统筛选到一个候选基因,PPI5诱导了烟草叶片细胞的坏死反应。进一步实验发现PPI5诱导的细胞死亡不依赖于与PTI和ETI相关的介导细胞死亡的途径。酵母信号肽实验、蛋白涂抹实验、全量免疫组化实验进一步证明了PPI5分泌到植物中干扰植物的防御反应。在烟草和棉花异源表达PPI5不仅增加了烟草和棉花对棉铃虫的易感性,还抑制了棉花和烟草的JA、SA响应。为了探究PPI5对棉花和烟草激素水平的调控作用,团队用PPI5做诱饵进行酵母文库筛选。Y2H, LCI, BIFC和Pulldown实验证明PPI5与GhFKBP17-2直接互作。进一步实验发现,PPI5与GhFKBP17-2共定位在内质网上且PPI5直接抑制GhFKBP17-2的PPIase酶活和内质网介导的植物免疫。

    最后,CRISPR/Cas9敲除突变体(CR-GhFKBP17-1/3)、VIGS材料 (TRV: GhFKBP17-2)和过表达系(OE -GhFKBP17-1/3)在温室和田间的昆虫生物测定实验共同表明GhFKBP17-2在棉铃虫侵染中正向调节内质网(ER)应激介导的植物免疫。

        综上,团队解析了PPI5和GhFKBP17-2在调节植物防御反应和敏感性的互作模型。昆虫摄食会诱导食草动物相关分子模式(HAMP),从而激活内质网(ER)定位蛋白 FKBP17-2。这种激活会触发ER中的未折叠蛋白反应(UPR),从而诱导ER应激,最终导致细胞程序性死(PCD)。此外,棉铃虫的口腔分泌蛋白 PPI5 通过取食造成的机械伤口进入植物体内。一方面,PPI5 与 GhFKBP17-2 相互作用,抑制蛋白质的表达和 PPIase 的活性,从而抑制 ER 应激介导的植物免疫。另一方面,PPI5 还能抑制 JA 和 SA 的防御反应。PPI5 介导的植物免疫抑制可能会使植物更容易受到棉铃虫的入侵,从而改善棉铃虫的取食和发育。

  • 原文来源:http://www.ebiotrade.com/newsf/2024-10/20241007064543934.htm
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  • 《动物所揭示棉铃虫感受植物苦味物质香豆素的味觉受体》

    • 来源专题:转基因生物新品种培育
    • 编译者:姜丽华
    • 发布时间:2022-10-31
    •   植物次生物质是植物体内经过复杂的分支代谢途径的产物,一般没有营养价值,但构成不同植物特有的味道,进而在植物防御中起到关键作用。植食性昆虫对植物的喜好程度取决于次生物质的种类和含量。农业害虫棉铃虫(Helicoverpa armigera)虽然危害很多农作物,但对不同作物的喜好程度、危害程度均不同,其中“苦味”的次生物质的存在是决定幼虫是否偏好取食的关键因素。   10月8日,中国科学院动物研究所王琛柱研究团队在PLoS Genetics上,发表了题为Functional analysis of a bitter gustatory receptor highly expressed in the larval maxillary galea of Helicoverpa armigera的研究论文。该研究揭示了棉铃虫味觉受体HarmGr180是苦味物质香豆素(coumarin)的受体,并参与幼虫对黑芥子苷(sinigrin)和马钱子碱(strychnine)的感受。   该团队前期的转录组分析发现,在棉铃虫幼虫的口器上表达多种味觉受体(gustatory receptor,Gr),其中HarmGr180的表达量最高。当将该受体基因在爪蟾卵母细胞表达后,研究通过双电极电压钳记录发现,表达HarmGr180的细胞特异地对香豆素有电生理反应(图1)。研究核实了幼虫口器上的味觉感器是否有对香豆素反应的感器。研究利用顶端记录发现,在幼虫口器的下颚外颚叶上,一对中栓锥感器对香豆素有电生理反应,且香豆素可抑制另一对侧栓椎感器对蔗糖的反应。   为了剖析HarmGr180的在体功能,科研团队利用CRISPR/Cas9系统构建并获得了棉铃虫的HarmGr180纯合突变体(HarmGr180-/-)。研究显示,该突变体幼虫中栓锥感器失去了对香豆素的反应,同时降低了对黑芥子苷和马钱子碱的反应,但不影响香豆素对侧栓椎感器的抑制作用(图2)。进一步的行为学实验表明,尽管香豆素、黑芥子苷和马钱子碱对突变体幼虫仍有一定的取食遏制作用,但取食遏制指数显著降低。   科研人员从分子生物学、组学、电生理学、行为等角度揭示了棉铃虫苦味受体HarmGr180的功能,这对增进对植食性昆虫味觉感受分子基础的认知、研发害虫拒食剂具有重要意义。棉铃虫苦味受体估计有180个,其中多数功能尚未知。该研究为后续研究工作奠定了基础,并为其他植食性昆虫味觉研究提供了新视角。
  • 《武汉植物园在植物根部挥发物释放的调控机制和生态效应取得新进展》

    • 来源专题:长江流域资源与环境知识资源中心 | 领域情报网
    • 编译者:changjiang
    • 发布时间:2019-04-18
    •   植物挥发物(volatile organic compounds)不仅可以帮助植物抵御生物和非生物胁迫,同时可以影响邻近植物的生长和防御,在调节植物和昆虫种群动态和群落组成方面起到重要作用。然而,以往研究更多的关注叶片挥发物的释放过程、作用机制和生态效应,忽略了根部挥发物在调节植物-植物互作和植物-昆虫互作的重要性。   中国科学院武汉植物园入侵生态学学科组与瑞士伯尔尼大学和德国马普化学生态研究所合作,以入侵植物斑点矢车菊为研究对象,通过气相色谱质谱分析和转录组测序等分析技术,研究发现斑点矢车菊根部释放大量倍半萜类物质,其主要的成分为(E)-β-Caryophyllene,释放速率为3μg/g/h;这些倍半萜类物质的合成主要是由6种倍半萜合成酶控制,其中CsTPS4 和CsTPS5合成酶起主要作用。通过竞争实验和生物测定等研究手段,研究发现在没有昆虫取食邻近植物的情况下,斑点矢车菊根部释放的倍半萜类物质可以显著提高部分邻近植物的种子萌发和个体生长;但是,在有昆虫取食邻近植物的情况下,这些倍半萜类物质的释放显著促进了昆虫在邻近植物上的取食危害程度,反而抑制邻近植物的生长。这些研究结果表明植物根部挥发物在调节植物-植物互作、植物-昆虫互作同样发挥着十分重要的作用。此外,研究结果同时指出入侵植物不仅可以通过资源竞争抑制本地植物,而且可以通过植物间的化学信息交流来改变本地植物与昆虫的互作关系,进而抑制本地植物,降低生物多样性。   相关研究结果已在期刊Plant, Cell & Environment在线发表。该研究得到重点研发计划(2017YFC1200100),自然科学基金(31470447和31822007)、欧盟玛丽居里行动计划(629134和704334)等的资助。武汉植物园黄伟研究员参与了研究论文1的部分工作,是研究论文2 的第一作者和共同通讯作者。