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《用于检测新型H7亚型流感病毒中血凝素的小鼠单克隆抗体的开发和优化配对。》

  • 来源专题：实验室生物安全
  • 编译者： 张虎
  • 发布时间：2019-06-30

  • H7亚型禽流感威胁着家禽和人类的公共健康。 因此，特定和敏感的诊断测试对于H7亚型流感感染的管理是必不可少的。 在该研究中，产生了针对甲型流感/安徽/ 1/2013（H7N9）的血凝素（HA）的5种小鼠单克隆抗体（mAb），并通过蛋白质印迹，免疫荧光和血细胞凝集抑制测定进行了表征。

  • 原文来源：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31147904
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    • 来源专题：新发突发疾病（新型冠状病毒肺炎）
    • 编译者：蒋君
    • 发布时间：2020-11-02
    • 流感仍然是全球性的健康风险和挑战。目前，神经氨酸酶（NA）抑制剂被广泛用于治疗流感，但由于耐药变体的出现，其疗效受到影响。以甲型流感病毒表面糖蛋白为靶点的中和抗体是流感治疗药物的重要组成部分，可以为现有的抗流感药物提供替代策略。然而，抗体疗法广泛应用的主要障碍在于难以快速产生大量非免疫原性抗体。在这里，我们报告了一种人源性单克隆抗体（MAb），53C10，从转色体牛（Tc）中分离出来，对H1N1亚型流感病毒的不同分支具有很强的中和和血凝抑制效价。抗体逃逸突变体的体外筛选表明，53C10在血凝素（HA）头部结构域中识别出一个新的非连续表位，分别在172、207和212位分别涉及甘氨酸（G）、丝氨酸（S）和谷氨酸（E）。我们的实验结果支持了207位精氨酸取代（S207R）在介导对53C10的抗性中的关键作用，而G172E或E212A的取代都不会改变抗体识别和中和。E212A突变可能为表位提供结构稳定性，而G172E的替代可能弥补了S207R引入的适应度损失。我们的研究结果为单抗53C10的作用机制提供了新的见解，并表明其在治疗人类H1流感病毒感染中的潜在作用。 流感病毒引起的呼吸道疾病仍然是全球健康的严重问题，中和抗体是抗病毒治疗的一个很有前途的领域。然而，大规模产生非免疫原性抗体的挑战往往阻碍了抗体的潜在应用。在本研究中，用转色牛（Tc）制备非免疫原性单克隆抗体（mab），并对这些单克隆抗体进行鉴定，发现一种单克隆抗体53C10对H1N1流感病毒具有较强的中和活性。对利用该单抗产生的中和逃逸突变体的进一步鉴定表明，HA头部结构域中的三个氨基酸替换参与了抗性的形成。这些发现强调了Tc牛在生产非免疫原性单克隆抗体中的重要性，并强调了单克隆抗体53C10在治疗人类感染H1流感病毒方面的潜力。
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  • 《基质蛋白2胞外区特异性单克隆抗体是治疗甲型流感的有效和潜在的通用方法》
    • 来源专题：新发突发疾病（新型冠状病毒肺炎）
    • 编译者：蒋君
    • 发布时间：2021-03-11
    • 流感病毒感染在世界范围内造成了严重的发病率和死亡率。人类不能对甲型流感产生普遍的记忆保护性免疫反应。血凝素和神经氨酸酶经历抗原漂移和转移，导致新的甲型流感病毒株，而人类对这些病毒株是幼稚的。季节性疫苗通常无效，所有甲型流感治疗方法都报告了逃逸突变体。在缺乏通用甲型流感疫苗或治疗的情况下，甲型流感仍将对人类健康构成重大威胁。M2离子通道胞外区（M2e）是一种理想的通用治疗药物的抗原靶点，因为它在甲型流感血清型中高度保守，突变率低，对病毒进入和复制至关重要。以前的M2e特异性单克隆抗体（M2e-mab）对甲型流感具有保护作用，但它们要么是菌株特异性的，要么作用有限。我们制备了七种小鼠M2e单抗，并利用体外和体内实验来验证我们的新型M2e单抗的特异性，并探索其保护潜力的普遍性。我们的数据显示，我们的M2e单抗与M2e肽、表达M2通道的HEK细胞、流感病毒粒子以及感染多种血清型流感病毒的MDCK-ATL细胞结合。我们的抗体通过提高存活率和体重减轻，显著保护对甲型流感病毒高度敏感的BALB/c小鼠免受H1N1 A/PR/8/34、pH1N1 A/CA/07/2009、H5N1 A/Vietnam/1203/2004和H7N9 A/Aniwang/1/2013的致命攻击。基于这些结果，我们的七种M2e单克隆抗体中至少有四种显示出作为通用甲型流感治疗药物的强大潜力。
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