《基于特异性鸡蛋黄抗体的脊髓灰质炎病毒结合抑制ELISA作为中和试验的替代。》

  • 来源专题:实验室生物安全
  • 编译者: 张虎
  • 发布时间:2019-05-16
  • 首次应用酶免疫测定系统(ELISA) - 结合抑制ELISA(BI ELISA)检测三种类型的脊髓灰质炎病毒抗体,基于使用鸡蛋黄(IgY)特异性抗体。 ELISA的这种变体是“替代”中和试验(NT)。 当比较90份接种口服和灭活脊髓灰质炎病毒疫苗的儿童血清中抗体检测结果时,BI ELISA和NT之间的相关性良好(r = 0.67,0.61,分别为1,2,3型,0.76)。 结果显示。 所提出的ELISA变体是用于病毒感染的实验室诊断的“IgY技术”的进一步发展阶段,即脊髓灰质炎病毒感染,其可用于血清流行病学研究,作为需要使用生命脊髓灰质炎病毒的NT的类似物。

  • 原文来源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/30660606
相关报告
  • 《基于脊髓灰质炎假病毒的简单且安全的抗体中和测定》

    • 来源专题:实验室生物安全
    • 编译者:苑晓梅
    • 发布时间:2018-10-28
    • 评估基于Sabin菌株的灭活脊髓灰质炎病毒疫苗(sIPV)的免疫原性需要在中和测定中使用野生菌株来评估抗体的潜在交叉反应性。包括野生和萨宾菌株在内的活病毒株必须在3级生物防护实验室进行处理。为了开发不使用活病毒的替代测定,我们通过将荧光素酶报告基因插入完整的衣壳蛋白中来构建Mahoney,MEF-1和Saukett假病毒。然后,我们开发了基于假病毒的中和试验(pNT)并评估了特异性和可重复性。我们通过pNT测试了sIPV疫苗临床试验的血清样本,并将结果与常规中和试验(cNT)的结果进行了比较。两种方法之间观察到强烈的相关性,所有三种类型的IPV疫苗的相关系数均大于0.82(p <0.0001)。通过pNT获得的几何平均滴度(GMT)值大约是cNT的四倍,揭示了pNT的更好的灵敏度。总之,pNT是一种安全,快速和灵敏的定量检测方法,有可能成为评估脊髓灰质炎疫苗效力的替代方法。
  • 《通用ELISA用于定量灭活脊髓灰质炎疫苗中D抗原。》

    • 来源专题:实验室生物安全
    • 编译者:张虎
    • 发布时间:2019-11-26
    • 为了解决与生产灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV)有关的生物安全性和生物安全问题,一些制造商开始使用减毒的萨宾菌株生产这种疫苗。野生株和减毒株之间的轻微免疫学差异为测试IPV效能提出了挑战,IPV效能的定义是在ELISA测试中确定的保护性D抗原含量。选择用于测试由野生株(cIPV)制成的常规IPV的某些ELISA试剂可能不适合测试Sabin IPV(sIPV)。本文介绍了一种使用人单克隆抗体的ELISA方法,该抗体被选择为能同时很好地捕获脊灰病毒的野生株和减毒株。中和脊髓灰质炎病毒所有三种血清型的独特单克隆抗体用作检测抗体。结果表明,该方法仅检测常规和Sabin IPV的D抗原,并且严格血清型特异性。该方法高度灵敏且稳定,可在各种浓度范围内产生线性结果。我们还发现,用于测量cIPV和sIPV效力的参考标准必须由各自的疫苗制成。这使得不可能交叉校准由异源疫苗制得的效价试剂,并且需要建立一个新的单位来测量sIPV的效能,这不同于常规的D抗原单位。