《中国科学院海洋研究所在深海原位验证了微生物介导的单质硫形成新通路》

  • 来源专题:中国科学院文献情报系统—海洋科技情报网
  • 编译者: liguiju
  • 发布时间:2022-07-24
  • 7月20日,国际学术期刊mBio刊发了题为“Deep-sea in situ insights into the formation of zero-valent sulfur driven by a bacterial thiosulfate oxidation pathway”的文章,报道了中国科学院海洋研究所孙超岷课题组在深海冷泉原位环境验证细菌氧化硫代硫酸钠形成单质硫新型途径的研究成果,为深海原位研究微生物特殊生命过程提供了可借鉴的手段,也为解释我国南海冷泉喷口广泛分布硫单质的成因提供了理论证据。

    在前期科考调查中,海洋所张鑫研究组基于拉曼光谱观测到我国南海冷泉环境中单质硫含量丰富,但是形成原因不清晰。孙超岷课题组发现一株冷泉细菌Erythrobacter sp. 21-3能基于一条新型硫氧化途径高效氧化硫代硫酸钠形成单质硫,该新型硫氧化途径在很多深海微生物中都存在,对深海硫元素循环有重要贡献(ISME J, 2020)。但限于各种原因,该硫氧化途径在深海原位是否发生一直未得到验证。借助2020年“科学号”考察船的南海冷泉航次,孙超岷课题组将冷泉细菌Erythrobacter sp. 21-3及其突变株布放到深海冷泉喷口附近原位培养了10天,收回细菌培养物后,综合运用拉曼光谱、蛋白组学、分子生物学及分子遗传学等手段证实该菌株在深海原位的确能形成硫单质,而敲除掉硫氧化途径中关键基因tsdA(Thiosulfate dehydrogenase)及soxB (Thiosulfohydrolase)后,细菌形成硫单质的能力大幅下降,这与实验室的研究结果高度一致。与实验室结果不同的是tsdA敲除株在实验室条件下不能利用硫代硫酸盐产生单质硫,而原位条件下却能够产生单质硫,经过研究发现该突变株能够利用深海冷泉广泛存在的连四硫酸盐启动上述硫氧化途径形成单质硫;而在实验室条件下,连四硫酸盐需要TsdA代谢硫代硫酸盐形成。上述结论的差异也提示深海研究工作者需要综合考虑实验室和深海原位的条件差异,进行更为全面的实验验证才能真正了解深海微生物的真实生命过程,这些研究的顺利进行需要生物、地质、物理海洋等多学科交叉合作才能完成。进而,研究人员发现相比于能够产生少量单质硫的tsdA敲除株,不产生单质硫的soxB敲除株下调的蛋白总体集中在能量的产生及转换通路上。相应地,科研人员证实了E. flavus 21-3在实验室和深海原位均能够利用单质硫作为营养源进行生长。相比之下,原位条件下,E. flavus 21-3的单质硫产生途径对其生长、能量的生成和转化来说意义更为重要。最后,研究人员基于宏基因组测序手段发现冷泉的在冷泉沉积物硫代谢基因丰度最大的表层,具有新发现的硫氧化途径的细菌基因组约占组装基因组总数的25%,认为该通路的在冷泉当中具有一定的普遍性,推测对于冷泉的硫循环有重要贡献。

    该研究成果第一作者为实验海洋生物学重点实验室博士研究生蔡瑞宁,孙超岷研究员为通讯作者。研究得到了青岛海洋科学与技术试点国家实验室“十四五”重大项目、中国科学院战略先导专项、中国科学院海洋大科学研究中心重点部署项目等项目联合资助。

    相关论文:Ruining Cai, Wanying He, Rui Liu, Jing Zhang, Xin Zhang, Chaomin Sun*. Deep-sea in situ insights into the formation of zero-valent sulfur driven by a bacterial thiosulfate oxidation pathway. mBio, 2022. Doi: 10.1128/mbio.00143-22.

    论文链接:https://journals.asm.org/doi/10.1128/mbio.00143-22

  • 原文来源:http://www.qdio.cas.cn/2019Ver/News/kyjz/202207/t20220721_6487844.html
相关报告
  • 《中国科学院海洋研究所成功实现微生物代谢过程的原位拉曼可视化定量分析》

    • 来源专题:中国科学院文献情报系统—海洋科技情报网
    • 编译者:liguiju
    • 发布时间:2023-03-29
    • 中国科学院海洋研究所张鑫课题组和孙超岷课题组共同合作,基于共聚焦显微拉曼技术,通过三维定量成像实现了长期、近实时、非破坏性的微生物监测,对微生物生长和代谢情况进行可视化及定量分析,为未来分析微生物原位生物过程提供了新思路。研究成果近日发表于国际学术期刊《微生物学谱》(Microbiology Spectrum,IF= 9.043)上。 张鑫课题组在之前的工作中,观测到我国南海冷泉环境中单质硫含量丰富。随后孙超岷课题组发现了冷泉细菌Erythrobacter flavus 21-3可以高效氧化硫代硫酸钠生成单质硫,张鑫课题组通过拉曼光谱鉴定后发现单质硫结构为环状S8,研究成果发表在生物学领域权威期刊《国际微生物生态学会杂志》(The ISME Journal)。后续两个课题组合作将E. flavus 21-3及其突变株布放到深海冷泉喷口附近进行原位培养,证实该菌株在深海原位环境中也能形成硫单质,相关成果发表在国际生物学期刊《微生物学》(mBio),为解释我国南海冷泉喷口广泛分布硫单质的成因提供了重要理论依据。 由此可见,微生物是深海硫形成和循环的重要贡献者,其介导的硫代谢的研究对于了解深海硫循环至关重要。然而,由于深海环境极端复杂,采样困难、微生物难于分离培养等因素,以及缺少对硫元素的形成的近实时无损的监测方法,深海微生物的原位探测面临巨大挑战。目前主要通过经典的生物和化学方法研究硫元素的生成过程,例如X射线吸收近边结构、高效液相色谱、透射电子显微镜、离子色谱法或化学计量法等。但是这些方法主要通过取样来获知特定时间点的微生物代谢情况,不能在不破坏样品的前提下连续监测其在时间尺度上的代谢过程;并且其中一些方法样品制备复杂,会破坏细胞的原位真实性;也可能会出现取样不均匀及污染的情况,导致难以实现连续的原位观察。因此,亟需新的方法突破此瓶颈。 共聚焦显微拉曼三维成像技术拥有低成本、快速、无标签和无破坏性的优势,具有将定性、定量和可视化完美结合的潜力,为我们解决相关问题提供了新的思路。因此,为证明此技术的潜力,研究团队构建了一套固态基底上微生物群落拉曼三维定量原位分析方法,将光学可视化与拉曼定量分析相结合,可在时间和空间两个维度上无损定量表征微生物群落代谢过程。该技术已成功应用到深海冷泉细菌E. flavus 21-3硫代谢过程的原位监测。基于拉曼三维成像进行体积计算和比率分析,对不同环境下的菌落生长和代谢进行了量化,发现了生长和代谢方面不为人知的细节,为厘清深海冷泉生物群落中广泛分布的硫单质成因提供了重要技术支持。据我们所知,这是首次尝试长期监测菌落在固体培养基中生长的原位无损技术。我们能够快速确定代谢产物,推断反应发生的途径,并快速筛选产硫细菌。由于这一成果的应用,不仅证明了该方法在未来对微生物原位过程的可视化及定量分析的潜力,也为研究深海中附着在岩石沉积物等固体表面上的微生物提供了新的思路。 中国科学院海洋所博士研究生何婉莹、蔡瑞宁为文章共同第一作者,研究员张鑫、孙超岷为文章通讯作者,正高级工程师栾振东、副研究员杜增丰、博士席世川、硕士研究生殷子钰为文章共同作者。研究得到了国家自然科学基金、中国科学院A类战略性先导专项、中国科学院海洋大科学研究中心重点部署项目、泰山青年学者计划等项目联合资助,以及WITec公司吴望华博士和胡海龙博士的支持。    相关成果如下:    Wanying He; Ruining Cai; Shichuan Xi; Ziyu Yin; Zengfeng Du; Zhendong Luan; Chaomin Sun*, Xin Zhang*. Study of microbial sulfur metabolism in a near real-time pathway through confocal Raman quantitative 3D imaging[J]. Microbiology Spectrum, 2023, IF= 9.043. 论文DOI: 10.1128/spectrum.03678-22 Jing Zhang; Rui Liu; Shichuan Xi; Ruining Cai; Xin Zhang, Chaomin Sun*. A novel bacterial thiosulfate oxidation pathway provides a new clue about the formation of zero-valent sulfur in deep sea[J]. The ISME Journal, 2020,14(9):2261-2274. 论文DOI: 10.1038/s41396-020-0684-5 Ruining Cai; Wanying He; Rui Liu; Jing Zhang; Xin Zhang, Chaomin Sun*. Deep-sea in situ insights into the formation of zero-valent sulfur driven by a bacterial thiosulfate oxidation pathway[J]. mBio, 2022,13(4):e14322. 论文DOI: 10.1128/mbio.00143-22
  • 《中国科学院海洋研究所揭示深海硫氧化细菌单质硫形成与光能利用耦合新机制》

    • 来源专题:中国科学院文献情报系统—海洋科技情报网
    • 编译者:liguiju
    • 发布时间:2023-04-02
    • 近日,国际分子生物学期刊The EMBO Journal(Nature index)刊发了题为“Blue light promotes zero-valent sulfur production in a deep-sea bacterium”的论文,报道了中国科学院海洋所孙超岷课题组在深海硫氧化细菌硫代谢和光能利用耦合机制方面的最新研究成果,为认知和评估微生物对深海硫元素循环的驱动作用和贡献提供了新角度,也为解释我国南海冷泉喷口广泛分布硫单质的成因提供了新思路。 在深海生命形式中,微生物类型最为多样,对元素生物地球化学循环发挥关键的驱动作用。在众多元素中,硫元素参与了许多重要生命活动,与多个元素循环通路相耦联,其生物地球化学循环过程一直是了解深海物质能量循环的关注点。单质硫作为硫元素循环过程的重要中间代谢产物,可为微生物暂时储存能量。在前期科考调查中,海洋所张鑫团队基于拉曼光谱观测到我国南海冷泉环境中单质硫含量丰富,但是形成原因不清晰。孙超岷课题组发现一株冷泉细菌Erythrobacter flavus 21-3能基于一条新型硫氧化途径将硫代硫酸钠转化成单质硫,该硫氧化途径在很多深海微生物中都存在(ISME J, 2020),在深海原位被证实也能真实发生(mBio, 2022),对深海硫元素循环有重要贡献。 一次偶然机会,研究人员发现蓝光可以显著提升该菌株产生单质硫的效率,这促使他们开展了更深入的探索性工作,并最终证实了一条蓝光促进深海硫氧化细菌形成单质硫的新通路。在该通路中,LOV组氨酸激酶LOV-1477是E. flavus 21-3光硫耦合通路中的重要蓝光感受器;LOV组氨酸激酶LOV-1477接收到外界蓝光刺激后,进一步激活二鸟苷酸环化酶DGC-2902,使其释放c-di-GMP调控下游通路;c-di-GMP进一步与含PilZ蛋白结构域的mPilZ-1753结合,增强其与硫代硫酸盐脱氢酶TsdA的相互作用,而后引起硫代硫酸盐代谢能力的增强,最终导致单质硫的产量增加。该团队还发现,在该菌株的光硫耦合通路中,硫代硫酸盐在TsdA的作用下转化为连四硫酸盐后,两个功能相同、可互为替代的硫氧化蛋白SoxB(SoxB-277和SoxB-285)能进一步将连四硫酸盐水解,驱动单质硫的生成。 作为一株来自深海冷泉的非光合细菌,E. flavus 21-3的单质硫产生为何会对光作出响应?要回答这个问题,首先需要明确深海是否有光以及深海微生物是否有利用光的能力。深海被认为是一个黑暗的、由化学能支撑维系的生态系统,但越来越多的证据表明深海存在不同形式的地质光(如热液区的热辐射光)或生物发光。相应地,孙超岷团队近年来陆续发现多种深海微生物能感知或利用光能。比如,热液非光合细菌正黄胞球菌可以通过光敏色素感知红外光(Environmental Microbiology, 2021);热液非光合细菌海源杆菌能借助形成的硫化镉纳米颗粒利用光能(Environmental Microbiology, 2021);冷泉非光合细菌海绵杆菌能感知蓝光(mSystems, 2022);冷泉绿弯菌新分支在实验室和深海原位环境均能进行光合作用(mBio, 2022)。上述这些成果充分证实了“深海有光且深海微生物具有利用光的能力”。那么,深海硫氧化细菌E. flavus 21-3的光响应能力会为它的生存带来哪些优势呢? 研究人员推测,由于单质硫可以用来储存能量,光硫耦合通路的存在会让E. flavus 21-3在蓝光出现时合成更多的单质硫,用于支持后期的生长代谢。该研究揭示了一种此前鲜有关注的深海微生物中光响应及硫代谢之间的耦联,对于后续探索深海微生物介导的元素循环与特殊能量代谢之间的耦合关系提供了新思路。值得一提的是,“科学”号科考船在整个研究过程中,无论是样品采集还是深海原位实验都发挥了不可替代的作用,彰显了大科学装置在深海研究中的重要性。 中国科学院海洋所博士研究生蔡瑞宁为第一作者,研究员孙超岷为通讯作者。研究得到基金委创新群体、基金委重大计划、山东省“十四五”重大项目等联合资助,同时也得到了中国科学院海洋研究所研究员张鑫及中国科学院南海海洋研究所研究员高贝乐团队的大力支持。     相关论文:Ruining Cai, Wanying He, Jing Zhang, Rui Liu, Ziyu Yin, Xin Zhang, Chaomin Sun*. Blue light promotes zero-valent sulfur production in a deep-sea bacterium. The EMBO Journal, 2023,e112514. DOI: 10.15252/embj.2022112514.    论文链接:https://www.embopress.org/doi/full/10.15252/embj.2022112514