COVID-19疫苗正在迅速发展，人体试验正在进行中。几乎所有这些疫苗都被设计成诱导针对SARS-CoV-2棘突蛋白的抗体以期望中和活性。然而，非中和抗体有引起抗体依赖性增强的风险。此外，SARS-CoV-2特异性抗体的寿命非常短。因此，除了抗体诱导疫苗外，还应考虑在SARS-CoV-2特异性细胞毒性T淋巴细胞（ctl）基础上开发新的疫苗。在这里，我们试图鉴定来自SARS-CoV-2非结构多蛋白1a的HLA-A*02:01限制性CTL表位。基于生物信息学，82个肽被首次预测为候选表位。82个肽中有54个与HLA-A*02:01有高度或中度结合亲和力。用脂质体包裹的54个肽分别免疫HLA-A*02:01转基因小鼠。细胞内细胞因子染色显示54个肽中有18个具有CTL表位活性，这是由于γ-干扰素（IFN-γ）诱导产生CD8+T细胞。在这18种肽中，选择了10种肽进行以下分析，因为它们具有很高的响应性。用含有10种多肽混合物的脂质体免疫小鼠，以鉴定优势CTL表位。一些肽在统计学上优于其他肽。令人惊讶的是，所有用脂质体10肽混合物免疫的小鼠对10肽没有表现出相同的反应模式。共有三种反应模式，表明肽疫苗接种后存在免疫优势层次，这可能为设计基于CTL的COVID-19疫苗提供更多的表位选择。
