抗原特异性CD4和CD8 T细胞是免疫反应的重要组成部分,但目前有关结核分枝杆菌特异性T细胞的广度、特异性、表型和功能,以及人类感染结核分枝杆菌结果的相关信息很少。促进人类结核分枝杆菌的评估,针对多种不同抗原特异性T细胞反应,我们试图开发一种需要低血液样本量的高通量和可重现的T细胞反应谱分析方法。我们在此描述了使用功能多样化的60个结核分枝杆菌抗原的重叠肽库,基于微量滴定板的稀释全血刺激分析的优化和标准化。使用IFN-γ产生抗原特异性读数,用50μl血液进行每个条件测定,并且可以扩增容纳额外的抗原。我们评估了批内和批间变异性,并对不同群体的结核分枝杆菌感染的健康成年人进行测试,在外国出生并在美国定居的结核分枝杆菌潜伏感染的成年人,以及与肯尼亚结核病流行地区结核分枝杆菌潜伏感染接触的结核病家庭。结核分枝杆菌特异性T细胞反应谱测定法进一步增强了免疫工具箱,评估结核分枝杆菌感染不同状态的结核分枝杆菌特异性T细胞反应,并且可以很容易的在资源有限的环境中实现。此外,纵向队列分析的应用将有助于评估治疗或疫苗诱导的抗原特异性T细胞应答的广度和特异性的变化,以及鉴定结核分枝杆菌特异性T细胞反应与结核分枝杆菌感染结果相关的鉴定。