《高通量全血分析法用于分析人结核分枝杆菌感染中的多种抗原特异性T细胞应答》

  • 来源专题:结核病防治
  • 编译者: 张玢
  • 发布时间:2018-04-18
  • 抗原特异性CD4和CD8 T细胞是免疫反应的重要组成部分,但目前有关结核分枝杆菌特异性T细胞的广度、特异性、表型和功能,以及人类感染结核分枝杆菌结果的相关信息很少。促进人类结核分枝杆菌的评估,针对多种不同抗原特异性T细胞反应,我们试图开发一种需要低血液样本量的高通量和可重现的T细胞反应谱分析方法。我们在此描述了使用功能多样化的60个结核分枝杆菌抗原的重叠肽库,基于微量滴定板的稀释全血刺激分析的优化和标准化。使用IFN-γ产生抗原特异性读数,用50μl血液进行每个条件测定,并且可以扩增容纳额外的抗原。我们评估了批内和批间变异性,并对不同群体的结核分枝杆菌感染的健康成年人进行测试,在外国出生并在美国定居的结核分枝杆菌潜伏感染的成年人,以及与肯尼亚结核病流行地区结核分枝杆菌潜伏感染接触的结核病家庭。结核分枝杆菌特异性T细胞反应谱测定法进一步增强了免疫工具箱,评估结核分枝杆菌感染不同状态的结核分枝杆菌特异性T细胞反应,并且可以很容易的在资源有限的环境中实现。此外,纵向队列分析的应用将有助于评估治疗或疫苗诱导的抗原特异性T细胞应答的广度和特异性的变化,以及鉴定结核分枝杆菌特异性T细胞反应与结核分枝杆菌感染结果相关的鉴定。

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  • 《结核分枝杆菌特异性Th22细胞的表征以及结核病与HIV合并感染的影响》

    • 来源专题:结核病防治
    • 编译者:蒋君
    • 发布时间:2020-10-27
    • 高效结核病疫苗的研制可能取决于研究人员对结核病保护性免疫反应的理解。越来越多的证据表明,产生IL-22的CD4+T细胞(称为Th22细胞)可能有助于对结核病的保护性免疫。因此,研究人员对72例有或无人类免疫缺陷病毒(HIV)-1感染的潜伏性结核感染(LTBI)或结核病患者的结核分枝杆菌(Mtb)特异性Th22(以及Th1和Th17)细胞进行了鉴定。研究了Mtb特异性CD4+T细胞的功能特性(IFNγ、IL-22和IL-17的产生)、记忆分化(CD45RA、CD27和CCR7)以及活化谱(HLA-DR)。在未感染LTBI的HIV患者中,我们检测到大量的IFN-γ;产生CD4+T细胞(中位数:0.93%)和产生IL-22的CD4+T细胞(中位数:0.46%)对Mtb有反应。IL-17产生CD4+T细胞的频率较低,中位数为0.06%。与先前的研究一致,IL-22是由CD4+T细胞的一个不同亚群产生的,而不是与IL-17共表达。与IFN-γ反应相比,结核分枝杆菌特异性IL-22应答显著降低(中位数:0.08%)。与Th1和Th17细胞相比,Mtb特异性Th22细胞表现出明显的记忆和激活表型。此外,Mtb特异性IL-22是由常规CD4+T细胞产生的,需要T细胞受体(TCR)参与。总之,研究人员确认Th22细胞在结核病免疫应答中起重要作用。HIV合并感染时,Mtb特异性Th22细胞的耗竭可能会增加患结核病的风险。
  • 《结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)对结核性腹膜炎的诊断价值》

    • 来源专题:结核病防治
    • 编译者:李阳
    • 发布时间:2015-11-07
    • 结核性腹膜炎(TBP)是由结核杆菌引起的腹膜慢性、弥漫性炎症,感染途径可由腹腔内结核直接蔓延或血行播散而来,以中青年多见,女性略多于男性。当前结核杆菌感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核感染引起的胸腔积液、胸膜炎等疾病中诊断价值方面的研究较多,但较少关注其对于结核性腹膜炎的临床诊断价值,为此,来自淄博市第一医院的3名研究人员比较了T-SPOT.TB、结核菌素试验(PPD)、血清结核抗体(TB-Ab)与腹水腺苷脱氨酶(ADA)4种方法针对结核性腹膜炎的检出阳性率、灵敏度、假阴性率、特异度等指标,旨在评价T-SPOT.TB用于结核性腹膜炎诊断的价值,其相关成果发表在《中华医院感染学杂志》2015年第25卷第18期。 研究选取TBP确诊患者30例、尚未确诊或怀疑为TBP患者25例(可疑组)及非TBP患者30例(对照组)作为分析样本,且各组在性别、年龄等方面的差异无统计学意义,具有可比性,之后应用SPSS分析软件对4种方法的检测结果进行统计学分析。 结果显示,若将TBP确诊和可疑病例作为一组共55例,对照组30例,总共85例患者经4种方法检测,则T-SPOT.TB、PPD皮试、血清TB-Ab及腹水ADA的检出阳性率分别为98.18%、49.09%、16.36%、36.36%,相互间的差异有统计学意义(P<0.05),且仅T-SPOT.TB的检测阳性率在可疑组与对照组之间的差异具有统计学意义(P<0.05),表明T-SPOT.TB的检测阳性率要高于常规检测方法。此外,还发现T-SPOT.TB检测的灵敏度为98.18%、假阴性率为1.81%、特异度为93.33%、假阳性率为6.67%、正确指数为0.92、病理诊断符合率为96.47%、阳性预测值为96.43%、阴性预测值为96.55%,而PPD的灵敏度为49.09%、假阴性率为50.90%、特异度为60.00%、假阳性率为40.00%、正确指数为0.09、符合率为52.94%、阳性预测值为69.23%、阴性预测值为39.13%,说明与仅次于T-SPOT.TB的PPD相比,T-SPOT.TB具有较高的发现患者及排除非患者能力。 综上所述,T-SPOT.TB在结核性腹膜炎诊断方面具有较高的灵敏度和特异度,且快速准确,在筛检和诊断TBP中具有较高的临床应用价值。