《丙肝病毒共价闭合环状DNA细胞核的特异性和不降解性》

  • 来源专题:病毒性肝炎防治
  • 编译者: 肖宇锋
  • 发布时间:2014-12-18
  • 目前目前的抗病毒药物可以控制,但不能消除乙型肝炎病毒(HBV),因为HBV建立一个稳定的核共价闭合环状DNA(cccDNA)。干扰素-α治疗可以清除HBV但是会带来全身性的副作用。我们阐述了干扰素-α如何诱导无肝毒性的核病毒DNA特异性降解并提出淋巴毒素-β受体激活可以作为一种治疗选择。干扰素-α和淋巴毒素-β受体的激活上调apobec3a和APOBEC3B胞苷脱氨酶,分别在HBV感染的细胞、肝细,和人肝穿刺活检。乙型肝炎病毒核心蛋白介导共价闭合环状DNA核并与其相互作用,导致胞苷脱氨、脱嘌呤/脱嘧啶的形成,最终共价闭合环状DNA退化,防止HBV再激活。基因组DNA不受影响。因此,例如诱导核脱氨酶,通过淋巴毒素-β受体的激活可以产生新疗法,结合现有的抗病毒药物,可以治疗乙肝。

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  • 《Nature | cGAS核内降解的分子机制》

    • 来源专题:战略生物资源
    • 编译者:李康音
    • 发布时间:2024-02-29
    • 2024年2月28日,瑞士洛桑联邦理工学院Andrea Ablasser教授团队在Nature期刊上发表题为The CRL5–SPSB3 ubiquitin ligase targets nuclear cGAS for degradation的文章。 文章首先通过活细胞成像和定量图像细胞分析(QIBC)技术发现在细胞有丝分裂时,胞质中的cGAS会完全结合到染色质上,然后集中于子细胞的细胞核内。随着细胞周期的推移,子细胞中的核cGAS不断减少,而胞质中的cGAS增加。尽管通常认为这是核内cGAS转运到胞质中的结果,但通过光转化荧光标签的追踪发现,核cGAS实际上从未转运到细胞质中,而是在细胞核内被降解。通过大规模RNAi沉默筛选,研究者发现泛素化连接酶复合物CUL5,以及一个尚未被研究过的受体SPSB3对cGAS的核内降解起着重要的调节作用。 通过冷冻电镜三维重构技术,研究者成功解析了核小体NCP-cGAS-SPSB3复合物的结构。他们发现,受体SPSB3能够特异性识别cGAS C端末尾的一个在脊椎动物中保守的NN序列。利用CUL5复合物家族已知的结构,研究者构建了cGAS和SPSB3-CUL5-RBX2-ARIH2-UBiquitin泛素连接酶复合物的完整结构模型。在这个模型中,研究者观察到cGAS含有一个保守的赖氨酸对“KK”(lysine pair),紧邻泛素化酶的活性位点。通过质谱分析和体外泛素化筛选,研究者确认了这个保守的赖氨酸对是cGAS被泛素化降解的关键修饰位点。 通过对cGAS的SPSB3识别位点NN、以及泛素化位点KK进行突变,研究者观察到突变后的cGAS在细胞核中大量积累,并引发了干扰素相关基因的激活。相对于野生型而言,通过mRNA转染表达的降解抵抗突变型cGAS,在癌细胞中的留存以及免疫激活时间增强了四倍以上,为癌症免疫疗法提供了一个新的潜在的工具。 总的来说,该研究通过对cGAS在分子和细胞水平的深入研究,详细探讨了其在胞质中翻译生成后,如何依赖于细胞周期进行转运和降解,并详细解释了在细胞核中被泛素化降解的分子机制。这一研究系统性地阐述了cGAS在维持细胞免疫稳态方面的重要作用,除了核小体抑制之外,还强调了cGAS通过核内降解来维持免疫平衡的必要性。这为激活或抑制自身免疫系统提供了新的思路,对于免疫学领域具有重要的意义。
  • 《通过基因型特异性PCR和深度测序确定英国混合基因型丙型肝炎病毒感染的流行率》

    • 来源专题:病毒性肝炎防治
    • 编译者:肖宇锋
    • 发布时间:2018-04-18
    • 英国混合基因型丙型肝炎病毒(HCV)感染的发病率在很大程度上是未知的。由于直接作用抗病毒药物的疗效在不同基因型之间是可变的,所以治疗方案针对感染的基因型而定制,这可能对未确诊的混合基因型HCV感染中潜在基因型的治疗构成问题。因此需要在治疗前准确诊断混合基因型感染。以PCR为基础的诊断工具,筛选出英国基因型1a和3引起的混合基因型感染的发生率,这些基因型在506名诊断有这些基因型的个体的队列中。总体感染率为3.8%; 然而,这一比率分布不均。混合感染样本由主要和次要基因型组成,其中后者占总病毒载量的不到21%,并且在67%的病例中少于1%的病毒载量。通过下一代测序Illumina PCR的队列子集比通过PCR获得的发病率高得多,这可能是由于该技术的非定量性质以及基于阴性对照指定假阳性阈值而发生的。