牛结核(bTB)是由牛分枝杆菌引起的。在感染的早期阶段,超过15%的感染牛分枝杆菌通过牛鼻腔分泌物分泌分枝杆菌,这可以通过巢式PCR检测。研究人员比较巢式PCR阳性的牛分枝杆菌感染牛(bTBPCR-P)和巢式PCR阴性的牛分枝杆菌感染牛(bTBPCR-N)的蛋白质谱差异,筛选有助于早期准确检测bTB的生物标志物。研究人员研究了血清和牛纯化蛋白衍生物(PPD-B)刺激血浆中bTBPCR-P(n = 20),bTBPCR-N(n = 20)和未感染牛(NC; n = 20)的蛋白表达谱,采用iTRAQ标记与二维液相色谱-串联质谱法(iTRAQ-2D LC-MS / MS)联合使用。经过全面分析,研究人员选择了15种假定差异表达的血清蛋白和15种血浆蛋白,通过与iTRAQ分析中使用的同一队列的平行反应监测(PRM)进行验证。在后续的酶联免疫吸附试验中确认了四种血清和五种PPD-B刺激的蛋白。PPD-B刺激的白介素8(IL-8)展示了将牛分枝杆菌感染牛与未感染牛的鉴别能力,曲线下面积(AUC)值为0.9662,而PPD-B刺激的C反应蛋白(CRP)显示了将bTBPCR-P与bTBPCR-N的鉴别能力,其AUC值为1.00。最后,对244头牛进行的双盲试验表明,PPD-B刺激的IL-8试验与传统试验(κ> 0.877)表现出良好的一致性,相对敏感性> 90%,相对特异性> 98%。 PPD-B刺激的CRP测试与巢式PCR表现出良好的一致性(κ= 0.9117),相对灵敏度为94%,相对特异性为97%。因此,PPD-B刺激的IL-8和CRP测试可用于检测bTB并将bTBPCR-P与bTBPCR-N进行鉴别。