克里米亚-刚果出血热（CCHF）是一种重新出现的人畜共患病毒性疾病，在亚洲，欧洲和非洲的许多地区都普遍存在。病原体是克里米亚-刚果出血热正念珠病毒（CCHFV），是通过硬tick传播的。 ick虫载体特别是属于透明膜物种的the虫作为贮藏和扩增宿主。包括绵羊，山羊和牛在内的脊椎动物是连接病毒和tick虫的持久桥梁。 CCHFV会导致人类致命的出血热。人类通常是通过叮咬被感染的s或与被感染动物密切接触而感染CCHFV的。免疫学测定法，主要是使用完整病毒抗原的酶联免疫吸附测定法（ELISA），已广泛用于动物的血清学监测。但是，整个病毒抗原具有很高的生物危害风险，只能在生物安全4级实验室生产。本研究致力于使用CCHF病毒的重组核蛋白（NP）作为抗原，开发，评估安全，灵敏和特异的IgG间接酶联免疫吸附测定（iELISA）。密码子优化的NP基因序列已合成，克隆并在pET28a +载体中表达。通过亲和层析将重组NP纯化至均质，并通过Western印迹和MALDI-TOF / MS分析对其进行表征。使用一组动物血清，将表征的蛋白质用于开发间接IgG微孔板ELISA。相对于市售ELISA试剂盒（Vector-Best，俄罗斯），对内部ELISA进行了比较评估，其中包含76个可疑样品，其一致性显示为90％，敏感性和特异性分别为79.4和100％。精密度分析表明，该方法在不同条件下均稳定可靠且可重复。此外，该测定法还用于印度不同地区的反刍动物的血清监测，显示反刍动物的血清阳性率为18％，表明该地区病毒继续流通。研究结果表明，采用重组NP开发的IgG iELISA是一种安全且有价值的工具，可用于对多种物种的CCHFV特异性抗体进行可扩展的高通量筛选。
