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2023年11月17日，哥伦比亚大学等机构的研究人员在 Science期刊发表了题为Mechanism of target site selection by type V-K CRISPR-associated transposases的研究论文。
CRISPR相关转座酶 (CASTs) 重新利用核酸酶缺陷的CRISPR效应子来催化RNA引导的大遗传有效载荷的转座。V-k型铸造具有潜在的技术优势，但缺乏准确性，并且该缺点的分子基础仍然难以捉摸。
该研究揭示了v-k型CASTs在TnsC丝的局部可用性的驱动下，与RNA依赖性整合一起维持了RNA非依赖性，“非靶向” 转座途径。使用冷冻电子显微镜，单分子实验和高通量测序，研究人员发现最小，无CRISPR的转座体优先引导非靶向整合在富含at的位点，并具有TnsB赋予的额外局部特异性。通过利用这一知识，研究人员在细胞中抑制了非靶向转座并将v-k型CAST特异性增加至98.1%，而不损害中靶整合效率。这些发现将为CAST系统的进一步工程设计提供信息，以实现精确的千碱基规模的基因组工程应用。
