结核病临床表现多样给临床诊断带来了极大困难。实验室检查对于结核病防治及诊断起着不可或缺的作用,包括以全菌体为靶标的病原微生物检测、以细菌核酸为靶标的分子生物学检测和以机体免疫反应及其产物为基础的检测方法,其中分子生物学检测是近些年发展起来的检测方法,具有快速、特异度及敏感度高等特点。基于此,来自西安市结核病胸部肿瘤医院的5名研究人员以于2014年4月至7月期间收集的378份西安市结核病胸部肿瘤医院收治的经病理确诊或细菌学确诊的肺结核患者痰标本为分析样本,采用实时荧光RNA恒温扩增检测技术(SAT)、分枝杆菌核酸检测(PCR-荧光探针,TB-NTM-PCR)和多色巢式荧光定量PCR(Xpert MTB/RIF)同时对同一份痰标本进行检测,并以MTB 960快速液体培养及痰直接抗酸染色镜检结果为金标准来分析SAT法、TB-NTM-PCR法及Xpert MTB/RIF法对MTB的检出率,比较3种检测方法的差异,评估其在临床诊断中的价值,其相关成果发表在《中华结核和呼吸杂志》2015年第38卷第9期。
研究发现,378份痰液标本中涂片阳性93例(24.6%,93/378),MTB 960快速液体培养阳性188例(49.7%,188/378),SSAT、TB-NTM-PCR及Xpert MTB/RIF法检测的总体阳性率分别为37.6%(142/378)、37.8%(143/378)和53.4%(202/378);痰抗酸染色镜检及MTB分离培养均为阳性(即涂阳培阳)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为84.6%(77/91)、91.2%(83/91)和96.7%(88/91),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=8.014,P=0.0182);痰抗酸染色镜检阴性而MTB分离培养为阳性(即涂阴培阳)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为61.9%(60/97)、44.3%(43/97)和80.4%(78/97),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=26.864,P<0.01);痰抗酸染色镜检阴性且MTB分离培养也为阴性(即涂阴培阴)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性率分别为1.6%(3/185)、6.5%(12/185)和16.8%(31/185),且基于x2检验的3种检测方法阳性率间差异有统计学意义(x2=29.061,P=0.018);痰抗酸染色镜检阳性而MTB分离培养为阴性(即涂阳培阴)时,SAT、TB-NTM-PCR及Xpen MTB/RIF法检测的阳性例数分别为3/5、5/5及5/5例。此外,以MTB 960快速液体培养和痰直接抗酸染色涂片镜检为金标准,3种检测方法中xpert MTB/RIF法的敏感度(87.6%,163/186)及阴性预测值最高(88.5%,185/209)且漏诊率最低(12.4%,24/193);SAT法特异度(98.2%,214/218)及阳性预测值最高(97.2%,138/142)且误诊率最低(1.8%,4/218);以960药敏试验结果为金标准,Xpert MTB/RIF法耐药基因检测的正确率为95.48%(148/155),敏感度为95.5%(128/134),特异度为95.2%(20/21)。
综上所述,SAT、TB-NTM-PCR和Xpert MTB/RIF法对结核病诊断均具有良好的辅助作用,其中Xpert MTB/RIF法无论对涂阳或涂阴肺结核均具有良好的检出率。