《在慢性乙型肝炎患者中替诺福韦耐药性的四重突变鉴定》

• 来源专题：病毒性肝炎防治
• 编译者： 肖宇锋
• 发布时间：2019-07-12

背景与目的

替诺福韦地索普西富马酸盐（TDF）是治疗慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染的最有效的核苷酸类似物之一。尚未报道由对TDF的基因型抗性引起的表型抗性。本研究旨在表征赋予替诺福韦耐药性的HBV突变。

方法

前瞻性研究了两例在含TDF治疗方案治疗期间病毒突破的患者。对编码HBV逆转录酶的基因进行测序。通过定点诱变构建了11个在逆转录酶基因中具有一系列突变的HBV克隆。通过Southern印迹分析和实时PCR确定每个克隆的药物敏感性。通过超深度测序和克隆分析评估突变体的相对频率。

结果

在2名患者的病毒分离株中常见5个突变（rtS106C [C]，rtH126Y [Y]，rtD134E [E]，rtM204I / V和rtL269I [I]）。新的突变C，Y和E与耐药性有关。在药物敏感性测定中，野生型HBV的IC50值为3.8±0.6μM，而CYE和CYEI突变体的IC50值分别为14.1±1.8和58.1±0.9μM。野生型HBV的IC90值为30±0.5μM，而CYE和CYEI突变体的IC90值分别为185±0.5和790±0.2μM。替诺福韦抗性突变体和野生型HBV对衣壳组装调节剂NVR 3-778具有相似的易感性（IC50 <0.4μM，分别对IC50 =0.4μM）。

结论

我们的研究表明，四重（CYEI）突变使ICV抑制HBV所需的替诺福韦量增加15.3倍，IC90增加26.3倍。这些结果表明，尽管遗传屏障很高，但可以出现替诺福韦抗性HBV突变体。