《12月9日_石蜡包埋标本中SARS-CoV和SARS-CoV-2的免疫组化和原位杂交检测》

  • 来源专题:COVID-19科研动态监测
  • 编译者: zhangmin
  • 发布时间:2020-12-23
  • 荷兰鹿特丹伊拉斯姆斯大学和伦敦大学等机构的研究人员12月9日在期刊Scientific Reports上在线发表了题为“Development of immunohistochemistry and in situ hybridisation for the detection of SARS-CoV and SARS-CoV-2 in formalin-fixed paraffin-embedded specimens”的文章。
    文章称,SARS-CoV-2对全球公共卫生造成了前所未有的压力,迫切需要为SARS-CoV-2开发动物模型,以帮助研究人员合理设计疫苗和治疗剂。在福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)标本中,能够可靠检测SARS-CoV和SARS-CoV-2病毒产物生物免疫组化和原位杂交技术具有很大的实用价值。研究人员对针对SARS-CoV刺突蛋白和核蛋白、双链RNA和刺突基因RNA探针的商业抗体进行了检测FFPE包埋的感染细胞的能力的评估。研究人员还测试了热介导和酶介导的病毒抗原回收方法,以确定最佳的病毒抗原回收率,并确定了替代的抗原回收方法以实现IHC方法的灵活性。研究人员使用天然病毒感染的细胞作为阳性对照材料,对表达冠状病毒(SARS,MERS)刺突的未感染细胞进行了评估,以作为涉及活病毒的生物安全替代方法。优化方案已成功应用于实验动物源性组织,这些病毒检测技术和控制物质生成技术可应用于对冠状病毒发病机制的研究和基于动物模型的治疗研究。
    原文链接:https://www.nature.com/articles/s41598-020-78949-0

  • 原文来源:https://www.nature.com/articles/s41598-020-78949-0
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    • 来源专题:COVID-19科研动态监测
    • 编译者:zhangmin
    • 发布时间:2020-04-20
    • 1.时间:2020年4月9日 2.机构或团队:香港大学李嘉诚医学院、香港大学附属玛丽医院、香港大学深圳医院、海南医学院-香港大学热带传染病联合实验室 3.事件概要: Clinical Infectious Diseases于4月9日出版了香港大学袁国勇教授等研究团队的论文“Comparative replication and immune activation profiles of SARS-CoV-2 and SARS-CoV in human lungs: an ex vivo study with implications for the pathogenesis of COVID-19”[1],全面研究了SARS-CoV-2感染在人肺组织中的复制、细胞嗜性和免疫激活特征,并以SARS-CoV作为比较。该研究提供了第一份在离体人类肺组织中比较SARS-CoV-2和SARS-CoV感染的复制能力和免疫激活特征的定量数据。结果发现,与SARS-CoV相比,SARS-CoV-2在人肺组织中的感染和复制效率更高。在48小时间隔内,SARS-CoV-2从受感染的肺组织中感染产生的感染性病毒颗粒比SARS-CoV感染产生的病毒颗粒多3.20倍(P <0.024)。SARS-CoV-2和SARS-CoV在细胞嗜性方面相似,均靶向I型和II型肺细胞和肺泡巨噬细胞。重要的是,尽管SARS-CoV-2病毒复制效率更高,但其并未在感染的人肺组织中显着诱导I,II或III型干扰素。此外,SARS-CoV感染上调了13种代表性促炎细胞因子/趋化因子中的11种(84.62%)的表达,而SARS-CoV-2感染仅上调了这13种关键炎症介质中的5种(38.46%),尽管其复制效率更高。 袁教授领导团队先前于3月26日在Clinical Infectious Diseases杂志出版了另一篇论文“Simulation of the clinical and pathological manifestations of Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) in golden Syrian hamster model: implications for disease pathogenesis and transmissibility”[2],建立了一种新颖的,易于获得的生理性叙利亚仓鼠小动物模型进行SARS-CoV-2感染用于探究临床、病毒学、组织病理学和免疫学特征,以研究COVID-19的致病性、传播和被动免疫效果。 4.附件: [1]https://academic.oup.com/cid/article/doi/10.1093/cid/ciaa410/5818134?searchresult=1# [2]https://academic.oup.com/cid/article/doi/10.1093/cid/ciaa325/5811871?searchresult=1
  • 《5月26日_FFPE样本中SARS-CoV-2感染的分子检测及SARS-CoV-2致命病例的组织病理学发现》

    • 来源专题:COVID-19科研动态监测
    • 编译者:zhangmin
    • 发布时间:2020-05-27
    • 1.时间:2020年5月26日 2.机构或团队:克利夫兰州立大学医学中心、凯斯西储大学医学院 3.事件概要: 5月26日,AJCP期刊发表了来自克利夫兰州立大学医学中心,凯斯西储大学医学院研究团队的题为“Molecular Detection of SARS-CoV-2 Infection in FFPE Samples and Histopathologic Findings in Fatal SARS-CoV-2 Cases”的文章。报告了2例SARS-CoV-2阳性个体的尸检方法和发现。 该文章指出,验尸检查是按照美国疾病预防控制中心的公共指南完成的。通过定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR),调查了每个病例的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)的组织中的SARS-CoV-2 RNA。SARS-CoV-2病毒基因组通过FFPE肺组织块的NGS测序进行了测序。 文章指出,验尸检查结果显示弥漫性肺泡损伤,未观察到病毒相关的肝、心脏或肾损伤。使用qRT-PCR检测方法,两病例均在肺、支气管、淋巴结和脾脏中检测到病毒RNA。在病例1中使用NGS进行RNA测序揭示了与带有ORF1a L3606F突变的西欧进化枝A2a最一致的突变。 该研究认为,可以从FFPE组织中进行SARS-CoV-2检测和病毒测序。SARS-CoV-2的检测和测序以及死后组织检查的形态学发现可以帮助更好地了解该病毒对人体健康的病理生理影响。 4.附件: 原文链接:https://academic.oup.com/ajcp/advance-article/doi/10.1093/ajcp/aqaa091/5843897?searchresult=1