阿根廷抗击新冠联盟的研究人员12月11日在期刊Scientific Reports上在线发表了题为“Structural and functional comparison of SARS-CoV-2-spike receptor binding domain produced in Pichia pastoris and mammalian cells”的研究报告。
文章称，毕赤酵母可用于生产重组蛋白，其成本较低且易于扩展。研究人员比较了巴斯德毕赤酵母和成熟的HEK-293T哺乳动物细胞中表达的SARS-CoV-2刺突蛋白的受体结合域（RBD）的构象。紫外吸收、圆二色谱和色氨酸荧光表明，从酵母和哺乳动物细胞中获得的RBD都是正确折叠的，具有相似的稳定性，如温度诱导的毕赤酵母和HEK-293T细胞中RBD展开的温度分别为50℃和52℃。此外，当离子强度增加时，两种变体的稳定性同样会降低，这与计算分析预测的一组离子相互作用可能稳定RBD结构一致。高效液相色谱、尺寸排阻色谱和质谱的进一步鉴定表明，毕赤酵母表达的RBD异质性高于HEK-293T细胞。毕赤酵母RBD可在生物反应器中规模化生产，产量超过45mg/L的90%纯蛋白，因此可用其大规模生产免疫中和抗体以及SARS-CoV-2血清学测试材料。
原文链接：https://www.nature.com/articles/s41598-020-78711-6
