《灭活上皮样品中的口蹄疫病毒,以便在低浓度实验室中安全运输和加工。》

  • 来源专题:实验室生物安全
  • 编译者: 张虎
  • 发布时间:2019-11-26
  • 在口蹄疫(FMD)爆发期间,潜在传染性样品(包括可疑病变的上皮)的运输和测试存在生物安全风险,尤其是在无FMD的国家。因此,在运输前使病毒灭活的治疗很重要。来自感染了O型血清型FMD病毒(FMDV)的牛的舌上皮(O ALG / 3/2014-血统O / ME-SA / Ind-2001d)或A(A IRN / 22/2015-血统A / ASIA / G- VII)在室温下在RNAlater,RNA Shield或磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)中孵育2、6、24或48 h。孵育后,将组织匀浆并通过病毒滴定进行测试。通过RT-qPCR对匀浆中的病毒RNA进行定量,用于测序,然后转染至LFBKαVβ6细胞中以回收感染性病毒。 RNAlater在24小时后孵育48小时后,IRN / 22/2015滴度降低4 log10,而在48小时孵育后完全降低。虽然在2、6和24 h后通过VI检测到O ALG / 3/2014,但滴定没有产生传染性病毒,这可能是冻融的结果。 RNA Shield在高浓度下具有细胞毒性,但在24小时后能有效灭活这两种菌株。无论试剂或灭活期长短,都可以进行RT-qPCR,VP1测序和RNA转染以恢复感染性病毒。 RNA Shield似乎是组织中FMDV失活的更好选择,但是建议24小时孵育。

  • 原文来源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31705919
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