《10月29日_科学家定量分析抗体亲和力并准确检测血清和唾液中的新冠抗体》

  • 来源专题:COVID-19科研动态监测
  • 编译者: zhangmin
  • 发布时间:2020-11-18
  • Nirmidas生物技术公司和美国加利福尼亚州公共卫生部等机构的研究人员10月29日在Nature Biomedical Engineering期刊上在线发表题为“Quantification of antibody avidities and accurate detection of SARS-CoV-2 antibodies in serum and saliva on plasmonic substrates”的文章。
    文章称,准确检测SARS-CoV-2抗体对于控制COVID-19大流行至关重要。研究人员使用抗体检测方法和抗体亲和力测定法检测了人类血清和唾液中针对SARS-CoV-2刺突蛋白S1亚基和受体结合域的抗体的含量。研究人员使用纳米结构质子金基质的放大近红外荧光色谱定量检测SARS-CoV-2、SARS-CoV-1和普通感冒病毒OC43、HKU1、NL63和229E中的冠状病毒抗原的免疫球蛋白亲和力。研究人员使用抗体检测法检测了52位COVID-19患者的血清免疫球蛋白M,并对457份COVID-19阴性血清样本中的456份样本进行了正确的分类。研究人员使用抗体亲和力测定法研究了抗体成熟模式、免疫记忆和COVID-19抗体对普通感冒冠状病毒的交叉免疫。
    原文链接:https://www.nature.com/articles/s41551-020-00642-4

  • 原文来源:https://www.nature.com/articles/s41551-020-00642-4
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    • 编译者:hujm
    • 发布时间:2022-06-26
    • 非处方的新冠测试可以快速显示你是否感染了SARS-CoV-2。但是如果你的测试结果是阳性的,没有类似的家用测试来评估你能在多长时间内避免再次感染。在一项新的研究中,来自美国约翰霍普金斯大学和拉根研究所的研究人员报告了一种简单、准确的基于葡萄糖仪的测试方法,它涉及一种新型融合蛋白。他们说,消费者有朝一日可能能够使用这种测试方法来监测他们自己的SARS-CoV-2抗体水平。相关研究结果于2022年6月8日在线发表在Journal of the American Chemical Society期刊上,论文标题为“Antibody–Invertase Fusion Protein Enables Quantitative Detection of SARS-CoV-2 Antibodies Using Widely Available Glucometers”。 针对SARS-CoV-2的疫苗和感染这种病毒本身可以在一段时间内预防未来的感染,但目前还不清楚这种保护到底能持续多久。免疫保护的一种很好的指标是一个人的SARS-CoV-2抗体水平,但是作为金标准的测量方法,酶联免疫吸附法(ELISA)需要昂贵的设备和专业技术人员。 血糖仪是现成的,易于使用,并可与远程临床服务相结合。科学家们一直在对这些设备进行改造,将检测与葡萄糖的产生结合起来,用于检测其他目标分子。例如,如果这种测试方法所用的检测抗体与患者血液中的抗体结合,那么就会发生反应,产生葡萄糖---这是血糖仪可以很好检测到的。 转化酶(invertase)对于这种类型的分析来说是一种有吸引力的酶,因为它能将蔗糖转化为葡萄糖,但很难用化学方法将这种酶附着在检测抗体上。 基于此,约翰霍普金斯大学的Netzahualcóyotl Arroyo-Currás、Jamie B. Spangler及其同事们想看看产生一种由转化酶和检测抗体组成的融合蛋白是否能够发挥作用,使SARS-CoV-2抗体水平能用血糖仪读取。 这些作者设计并产生了一种新型的融合蛋白,这种融合蛋白含有转化酶和一种与人类免疫球蛋白(IgG)抗体结合的小鼠抗体(即小鼠抗人IgG抗体)。他们发现,该融合蛋白与抗人类IgG结合,并成功地让蔗糖产生葡萄糖。 接下来,他们制作了带有SARS-CoV-2刺突蛋白的测试条。当浸泡在COVID-19患者的样本中时,患者的SARS-CoV-2抗体与SARS-CoV-2刺突蛋白结合。加入这种转化酶/抗人IgG融合蛋白,然后加入蔗糖,就会产生葡萄糖,所产生的葡萄糖可以用血糖仪检测。 他们通过用血糖仪对多名患者的样本进行分析来验证这种测试方法,发现这种新的测定方法与四种不同的ELISA一样好用。他们说,该方法也可仅改进后测试SARS-CoV-2变体和其他传染病。 参考资料: Elissa K. Leonard et al. Antibody–Invertase Fusion Protein Enables Quantitative Detection of SARS-CoV-2 Antibodies Using Widely Available Glucometers. Journal of the American Chemical Society, 2022, doi:10.1021/jacs.2c02537.
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    • 来源专题:COVID-19科研动态监测
    • 编译者:zhangmin
    • 发布时间:2020-03-23
    • 1.时间:2020年3月19日 2.机构或团队:Science 3.事件概要: Science发表通讯文章“New blood tests for antibodies could show true scale of coronavirus pandemic”,文章提到,世界各地的实验室和公司都在竞相开发抗体测试,其中一些已经用于小型研究并获得了商业批准,其中包括来自中国的一些实验室和公司,但是到目前为止,此类测试的大规模数据仍然缺乏,或者至少是不公开的。一种新的方法可以为实验室提供一种等待或购买商业测试的替代方法。西奈山伊坎医学院的病毒学家弗洛里安·克拉默(Florian Krammer)和他的同事发表了预印本论文,描述了他们已经开发出的SARS-CoV-2抗体检测方法以及复制方法。其认为这是最早广泛分发的此类详细协议之一,而且过程非常简单,其他实验室可以轻松地将其扩展为“每天筛查数千人”,并迅速收集更多有关准确性的数据和测试的特异性。Florian Krammer认为加上商业化检测的可用性不断提高,这意味着有关COVID-19免疫力的一些重要答案可能很快就会出现。 为了进行这项测试,研究人员首先在SARS-CoV-2的衣壳上设计了一个稍有变化的“刺突”蛋白版本。他们还分离了称为受体结合域(RBD)的刺突蛋白的短片段,该病毒用于附着到它试图入侵的细胞上。然后,他们使用细胞来产生大量改变的刺突蛋白和RBD。 这些实验室制造的分子为ELISA测试提供了基础,在该测试中,血液或血浆样品中的抗体在识别目标蛋白(此处为RBD或刺突蛋白)时会触发颜色变化。对三名确诊的COVID-19患者的四份血液样本以及在疫情爆发前存入的59份血清样本进行的初步测试表明,该测试有效,因为SARS-CoV-2抗体与测试蛋白质结合。它仅对COVID-19患者显示阳性结果,而对所有这些对照均未显示。 广泛的抗体测试还可为流行病流行过程的建模提供关键数据。当前的预测差异如此之大,引起一些科学家质疑是否需要严格的遏制措施,例如封城和社会隔离。通过指出由于轻度感染而已经免疫了多少人口,抗体数据可以提供病毒继续传播速度的关键。这样的数据可以为实际问题提供信息,例如是否以及如何重新开放已关闭的学校,在儿童中诊断出的病例相对较少,但是目前尚不清楚这是否是因为他们没有被感染,或者是因为他们的感染程度很轻,以至于没有引起人们的注意,测试儿童的SARS-CoV-2抗体应该可以解决该问题。 长期抗体测试还将帮助研究人员了解对病毒的免疫力能持续多长时间,这是未来任何疫苗的关键问题。对于其他冠状病毒,Krammer指出,感染后几个月的免疫力很强,但随后开始减弱。一月份,德国的医生正在从巴伐利亚的一小部分病例中检测COVID-19患者发现感染后一个月,抗体水平仍然很高。 4.附件: 原文链接: https://www.sciencemag.org/news/2020/03/new-blood-tests-antibodies-could-show-true-scale-coronavirus-pandemic