对生物安全3级(BSL3)药剂的科学调查需要特殊的收容设施和训练有素的工作人员。 BSL3病毒处理带来的风险限制了他们的研究,特别是在结构生物学中,因为高分辨率研究需要大量的病原体。 BSL3设施内的冷冻电子显微镜(cryoEM)产生非常高的成本,并且需要广泛且繁琐的去污方案。另一种策略是化学灭活致病病毒以促进BSL1环境中BSL3病毒的电子显微镜检查。我们开发了BSL2病毒的灭活方案,并通过EM分析评估了灭活样品的完整性。使用Orthobunyavirus(BSL2)作为模型生物,并且该方法随后在Orthohantaviruses(BSL3)上复制。通过用1%戊二醛进行化学固定来进行灭活。通过亚体积平均对目标分辨率为2nm的纯化和灭活的Orthohantaviruses进行冷冻断层扫描研究。该方案扩展到被致病病毒感染的全细胞。使用1%戊二醛使汉坦病毒感染的细胞失活。先前报道的基于常规固定和醇脱水的细胞灭活方案使细胞膜塌陷并提取细胞内容物以破坏细胞完整性。我们对灭活的细胞样本使用高压冷冻,其保留细胞器和膜,细胞内容物的提取最少。