本发明涉及一种构建重组谷氨酸棒杆菌生产新型靛蓝染料的方法,属于生物工程领域。通过将靛蓝合成酶基因(bpsA)及4’?磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因(sfp)克隆重组,共表达至谷氨酸棒杆菌中,构建重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum ATCC 13032?(BpsA?SFP),该重组谷氨酸棒杆菌能以L?谷氨酰胺为底物合成靛蓝染料。摇瓶发酵培养LBG液体培养基中,温度为30℃,发酵培养至菌体生长OD600达到0.6?0.8时,加入0.8mM IPTG及L?谷氨酰胺11.68g/L,18℃,继续培养48h,靛蓝色素indigoidine产量最高,达到1.75g/L。本发明采用生物工程的策略,构建的重组谷氨酸棒杆菌来合成目的产物靛蓝色素indigoidine,为生物法高产indigoidine提供了新的思路。