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《登革热和西尼罗河病毒NS2B-NS3蛋白酶的肽-β-内酰胺抑制剂表现出两种不同的结合模式。》

  • 来源专题：实验室生物安全
  • 编译者： 张虎
  • 发布时间：2019-12-07

  • β-内酰胺环代表有价值的部分，可以诱导抑制剂与其靶标共价结合。在这项研究中，我们探索了具有β-内酰胺亲电战斗部的二肽和三肽，作为登革热和西尼罗河病毒NS2B-NS3蛋白酶的抑制剂。具有（3S）-β-内酰胺部分的三肽显示出最高的活性，在生化和细胞分析中IC50和EC50值在较低的微摩尔范围内。对登革热蛋白酶的活性通常高于对西尼罗河病毒蛋白酶的活性。该化合物对脱靶凝血酶和胰蛋白酶无活性。 LC-MS实验表明三肽-β-内酰胺抑制剂以两种不同的结合方式与蛋白酶结合。仅一种结合模式导致β-内酰胺环与催化丝氨酸共价但可逆的相互作用，随后释放具有开放的β-内酰胺环的抑制剂。其他结合方式导致肽主链的裂解。该观察结果提供了第一个实验证据，表明黄病毒蛋白酶抑制剂中的苄氧基苯基甘氨酸位于酶的主要位点。

  • 原文来源：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31804823
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    • 发布时间：2019-12-02
    • Zika和登革热黄病毒的NS2B / NS3丝氨酸蛋白酶是开发抗病毒药物的诱人靶标。我们报道了合成和评估的基于脯氨酸的新型化合物类别，该类化合物对这两种蛋白酶都具有变构抑制作用。确定了蛋白酶结合和抑制作用中的变构结合位点，从而将其确立为黄病毒抑制剂的新先导化合物。基于我们的结构-活性关系研究，进一步优化了分子，从而产生了具有亚微摩尔IC50值和改善了亲脂性配体效率的抑制剂。通过诱变和用马来酰亚胺对获得的半胱氨酸突变体进行共价修饰来探测蛋白酶，然后通过计算阐明可能的结合模式。在感染的细胞中，使用抑制剂的前药观察到了对登革热病毒血清型2的抗病毒活性。靶向变构的新型抑制剂支架提出了黄病毒NS2B / NS3蛋白酶之间共有的位点，其功效在体外和纤维素中得到了证明。
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