抗冻蛋白(AFP)与冰晶结合以防止生物冻结。在鱼类和昆虫中发现了多种AFP折叠，包括α螺旋、球状蛋白和几种不同的β螺线管。但是，弹尾目等不会飞的节肢动物体内AFP的多样性尚未得到充分评估。在这里，来自寒冷或温带的22种弹尾目中的18种显示出抗冻活性。使用了几种方法来表征这些AFP，包括冰亲和纯化分离、MALDI质谱分析、氨基酸组成分析、串联质谱测序、转录组测序和序列数据库的生物信息学研究。所有这些AFP都具有高甘氨酸含量，并且预计具有相同的聚脯氨酸II型螺旋束折叠，这是弹尾目独有的折叠。这些六足动物出现在奥陶纪时期，已知产生AFP的两个目在大约4亿年前的安第斯-撒哈拉冰河时代发生了分歧。因此，AFP很可能在随后的两个冰河时代和中间的温暖时期出现并在许多谱系中持续存在，这与鱼类的AFP不同，鱼类的AFP在大约3000万年前的新生代冰河时代开始时独立出现。
