《玉米大斑病菌Homeobox转录因子家族全基因组鉴定及其表达规律分析》

  • 来源专题:转基因生物新品种培育
  • 编译者: Zhao
  • 发布时间:2017-02-20
  • 摘要【目的】从全基因组水平上鉴定玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)Homeobox转录因子家族及其分布,阐明该家族的序列及进化特征,分析该家族基因在病菌不同生长发育时期的表达规律。【方法】利用生物信息学手段搜索玉米大斑病菌全基因组数据库,鉴定Homeobox转录因子家族;采用MEGA 5.0软件进行系统进化树分析;利用在线工具GSDS(gene structure display server)(http://gsds1.cbi.pku.edu.cn/index.php)绘制基因结构图;利用Clustal X 1.83软件分析Homeobox保守结构域(HOX保守结构域)的氨基酸序列特征;利用SOPMA(https://npsa-prabi.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.plpage=npsa_sopma.html)对Homeobox蛋白的二级结构进行在线预测;利用实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)技术分析Homeobox转录因子家族在病菌不同发育时期的表达模式。【结果】在玉米大斑病菌中鉴定了8个Homeobox转录因子家族成员(StHTF1-8),根据基因结构及系统进化特征将其分为4类;亚细胞定位预测分析表明,这8个蛋白全部定位在细胞核中;该家族成员均含有HOX保守结构域,其二级结构具有特征性的“螺旋-转角-螺旋”(helix-turn-helix)结构;利用qRT-PCR技术对该家族成员在菌丝、分生孢子形成、芽管形成、附着胞及侵入丝形成等5个时期的表达规律分析,发现不同基因在病菌不同发育时期具有不同的表达水平,其中StHTF1在菌丝发育、分生孢子及附着胞形成等3个时期的表达水平相对较高,StHTF3、StHTF4在分生孢子形成时期表达水平最高,StHTF6在芽管形成时期的表达水平最高,StHTF2、StHTF5、StHTF7和StHTF8在附着胞形成时期的表达水平均较高。【结论】玉米大斑病菌包括Homeobox转录因子家族包含8个成员,在进化上分为4大类,全部成员均分布在细胞核内,其编码蛋白质均含有保守的HOX结构域及“螺旋-转角-螺旋”空间结构;该基因家族成员在病菌不同发育时期呈现不同的表达规律。

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    • 编译者:zhangyi8606
    • 发布时间:2018-05-31
    • 许瑞瑞1,2,李睿2,王小非2,郝玉金2 1潍坊学院生物与农业工程学院/山东省高校生物化学与分子生物学重点实验室,山东潍坊 261061;2山东农业大学园艺科学与工程学院/国家苹果工程技术研究中心,山东泰安 271018 Identification and Expression Analysis Under Abiotic Stresses of OFP Gene Family in Apple XU RuiRui1,2, LI Rui2, WANG XiaoFei2, HAO YuJin2 1College of Biological and Agricultural Engineering, Weifang University/Key Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology in Universities of Shandong, Weifang 261061, Shandong; 2College of Horticulture Science and Technology, Shandong Agricultural University/National Research Center for Apple Engineering and Technology, Tai’an 271018, Shandong 摘要 【目的】从苹果全基因组中鉴定OFP(OVATE family protein)家族蛋白成员,对其进行基因结构特征、组织表达及非生物逆境等系统分析,为研究苹果OFP的潜在功能提供理论基础。【方法】利用生物信息学手段,在苹果基因组数据库中筛选鉴定OFP基因家族成员;利用MEGA5.0软件进行系统进化树分析;通过MapDraw和GSDS等生物信息学工具分析基因结构及染色体定位;根据已有的苹果芯片数据库结果进行OFP基因表达谱分析;利用实时荧光定量PCR技术检测13个MdOFP的组织表达和诱导表达情况。【结果】苹果OFP基因家族包含28个成员,根据系统进化关系将其分为4组,分别包含13、6、4和5个成员;苹果中13条染色体上均有OFP基因分布,其中第12条染色体最多,有6个MdOFP成员,该基因家族的分布具有广泛性;芯片表达谱分析结果表明该类基因家族在花、果实和叶中的表达量较高,qRT-PCR验证结果较一致;经NaCl和PEG处理后,苹果根部与地上部呈现出不同程度的响应差异,NaCl处理明显诱导两组织中MdOFP04和MdOFP20的表达,MdOFP01、MdOFP12和MdOFP18的表达在根部与地上部组织则相反;温度胁迫明显影响MdOFPs的表达量,其中MdOFP04和MdOFP17经高温和低温胁迫处理后均明显上调。【结论】苹果OFP基因家族共有28个成员,分布于13条染色体上,该家族成员呈现出不同的组织表达模式和胁迫响应模式。 关键词 : 苹果, OFP基因家族, 系统进化, 胁迫, 基因表达 Abstract:【Objective】 Identification of the OFP (OVATE family protein) genes from apple genome and analysis of gene characteristic, tissue expression pattern and response to abiotic stresses of OFP family genes in apple will be useful to the functional analysis of plant OFP genes. 【Method】 Based on apple genome database, the OFP gene family members were identified and the genes were analyzed using bioinformatics methods. A phylogenetic tree was created using the MEGA5.0 program. Gene structure and chromosomes location were carried out by MapDraw and GSDS separately. Expression pattern analysis of OFP genes in different tissues was done based on the existing microarray database and qRT-PCR. The expression of 13 MdOFPs genes was also analyzed under various stress conditions using qRT-PCR. 【Result】 A total of 28 OFP genes was systematically identified from apple genome and classified into 4 groups including 13, 6, 4 and 5 members according to the gene structure and conserved domain phylogeny relationship. All OFP genes are distributed on 13 apple chromosomes with the largest number six MdOFP on Chr12, suggesting that they have an extensive distribution on the apple chromosomes. Most of the OFP genes have distinctive expression patterns in tissues and response to NaCl and PEG treatment stresses in root and shoot, respectively. MdOFP04 and MdOFP20 were up-regulated obviously in root and shoot, while MdOFP01, MdOFP12 and MdOFP18 have opposite expression pattern in root and shoot under NaCl stress. Temperature stresses significantly regulate the expression of MdOFP and the expression of MdOFP04 and MdOFP17 were significantly increased after high temperature and low temperature stresses. 【Conclusion】 Twenty-eight OFP genes in apple were identified by genome-wide screening. They are classified into four groups and distributed on 13 chromosomes with different tissue patterns and different stress response patterns. These results will be helpful to the functional analysis of OFP genes in apple. Key words: apple OFP gene family phylogeny analysis stress gene expression 收稿日期: 2017-09-20 基金资助:国家自然科学基金青年基金(31400225)、潍坊市科学技术发展计划(2016GX010) 通讯作者: 许瑞瑞,Tel:0536-8785288;E-mail:xuruirui2006@163.com。郝玉金,Tel:0538-8246692;E-mail:haoyujin@sdau.edu.cn 作者简介: 许瑞瑞,Tel:0536-8785288;E-mail:xuruirui2006@163.com
  • 《中国科学家解析玉米大斑病菌调控宿主可变剪切激活植物免疫的新机制》

    • 来源专题:农业生物安全
    • 编译者:李周晶
    • 发布时间:2025-04-14
    • 近日,中国农业科学院植物保护研究所粮食作物真菌病害监测与防控团队在Cell Reports杂志上发表了题为“The Exserohilum turcicum effector EtEC81 reprograms alternative splicing in maize and activates immunity”的研究论文。该研究发现了一个玉米大斑病菌效应因子EtEC81通过调控宿主可变剪切进而激活植物免疫的分子机制,为深入理解玉米和大斑病菌互作机理以及大斑病绿色防控提供了新的理论依据和基因资源。 前体mRNA(pre-mRNA)的可变剪接在植物生长发育和免疫反应中起关键作用,病原菌可以分泌效应蛋白干扰宿主pre-mRNA剪接从而抑制免疫。由大斑凸脐蠕孢菌(Exserohilum turcicum)引起的玉米大斑病在全球范围内都是严重威胁玉米生产的重要病害。目前针对该病原菌的研究主要集中在生理小种分化或抗病基因与抗性材料的筛选。由于该病原菌遗传转化效率低下,对于其效应蛋白的认识十分有限。 为了探究大斑病菌效应因子对可变剪切的影响,研究人员利用剪切报告系统筛选到一个能够显著调控植物可变剪切的效应因子,将其命名为 EtEC81(Exserohilum turcicum effector 81)。EtEC81编码三个连续的锌指结构域(ZnF_C2H2)和一个核定位信号(NLS),亚细胞定位实验发现其定位在细胞核中。敲除EtEC81病原菌突变体致病性增强,而异源过表达EtEC81则触发玉米免疫反应(如活性氧爆发、防御基因上调)和细胞死亡。利用酵母双杂交文库筛选系统获得一个玉米互作蛋白--ZmEIP1。ZmEIP1是玉米免疫正调控因子,与剪接体多个组分(如U1/U2 snRNP、Prp19复合体等)相互作用并参与众多pre-mRNA的剪接。与EtEC81结合后,ZmEIP1的剪接调控能力增强,共同导致119个共同差异剪接事件。RIP-seq实验显示,EtEC81具有RNA结合活性,但主要通过ZmEIP1间接调控下游基因的可变剪接。该研究揭示了大斑病菌效应蛋白EtEC81通过靶向ZmEIP1重编程玉米pre-mRNA可变剪接从而激活免疫的新机制。