《用于上呼吸道病毒病原体筛查和鉴别诊断的抗体微阵列免疫测定。》

  • 来源专题:实验室生物安全
  • 编译者: 张虎
  • 发布时间:2019-12-01
  • 上呼吸道感染是世界上最常见的传染病。实际上,上呼吸道感染(URTIs)背后的病原体是各种各样的病原体,例如流感,副流感,腺病毒,鼻病毒等。已知涉及200多种病原体。病毒感染的鉴别诊断有时会因其临床表现的多样性或相似性而变得复杂。这项工作致力于开发一种能够同时检测六种常见病毒性URTI病原体的方法:IAV; IBV; RSV; hAdV; hPIV2;和hPIV3。利用抗体微阵列技术来完成分析。在准备蛋白质微芯片的过程中,我们生产,鉴定并选择了约50种单克隆抗体;对于每个上述病原体,选择了最佳的单克隆抗体对。创建了蛋白质微芯片,并优化了其核心工作条件。考虑到便利性和最大测定灵敏度之间的平衡,开发了一种一步分析方法,用于在制造的微芯片(抗体微阵列)上完成ELISA样的“三明治”相互作用。参考病毒株用于确定检测的下限(LoD)。对于IAV,LoD为0.25µng / ml总病毒蛋白。对于其他病毒,LoD范围为总蛋白的1-2 ng / ml。这些灵敏度限度比标准ELISA的限度稍好,但不如PCR的限度。总的来说,我们认为开发的微芯片是现有方法的良好替代品,可以相对快速(过夜),廉价,同时筛选几种病原体。抗体微阵列的设计有利于进一步的开发,并且分析病原体的面板可以扩展到包括大约50个成员。

  • 原文来源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31783022
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  • 《《病毒性脑(膜)炎病原体诊断技术应用专家共识》发表》

    • 来源专题:新发突发传染病
    • 编译者:张玢
    • 发布时间:2023-07-08
    •   2023年3月7日,中华医学杂志发表了中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所许松涛研究员、中国医学科学院北京协和医院关鸿志教授、国家儿童医学中心(北京)首都医科大学附属北京儿童医院谢正德教授与同国内病毒学、传染病学、临床医学及医学检验等领域的35位专家反复讨论制定《病毒性脑(膜)炎病原体诊断技术应用专家共识》(下文称为《共识》)。《共识》从国内外病毒性脑(膜)炎病原种类、检测技术及检测策略等方面进行阐述,提出针对我国病毒性脑(膜)炎病原体的检测策略和方案,为病毒性脑(膜)炎的临床诊断以及疾病预防控制提供参考。《共识》在以下五方面提出重要认识:   一、引起病毒性脑(膜)炎的病原体种类   (1)单纯疱疹病毒是成人病毒性脑炎最常见的病原体;   (2)肠道病毒是我国儿童群体病毒性脑(膜)炎的主要病原体;   (3)我国乙脑发病率逐年下降,但仍是虫媒病毒引起的最重要的病毒性脑炎。   二、病毒性脑(膜)炎实验室检测的标本类型   (1)脑脊液标本主要用于病毒核酸检测,应尽量采集患者急性期的脑脊液样本;   (2)血清标本主要用于抗体的测定,应尽量采集患者急性期、恢复期双份血清;   (3)其他标本:根据患者症状,如出现疱疹时,可采集疱疹液或结痂标本;出现呼吸道症状时,可采集鼻咽拭子或肺泡灌洗液;出现腹泻、腹痛等症状时,可采集粪便标本。   三、病毒性脑(膜)炎病原体检测技术   (1)病毒性脑(膜)炎病原临床检测技术主要有病毒核酸检测和抗体检测;   (2)脑脊液病毒核酸检测包括PCR与mNGS,是目前病毒性脑(膜)炎病因确诊的主要方法;   (3)抗病毒抗体(IgM)检测对乙型脑炎、西尼罗脑炎以及蜱传脑炎具有重要诊断意义。   四、病原体检测策略   病原体检测优先级:   (1)第一组优先病原:主要包括HSV-1和HSV-2、VZV、肠道病毒、流行性乙型脑炎病毒(夏秋季节优先,以抗体IgM检测为主);   (2)第二组病原:包括腮腺炎病毒、EBV、CMV、发热伴血小板减少综合征病毒、HHV-6;   (3)第三组病原:包括腺病毒、麻疹病毒、风疹病毒、流感病毒、狂犬病毒、HHV-7、人双埃可病毒(<3岁儿童)、西尼罗病毒(新疆及其周边地区)、蜱传脑炎病毒(东北地区,有明确蜱叮咬史)。   病原体检测策略:   (1)根据患者年龄和发病季节,选择常见优势病原体进行检测,可采用单重PCR或者多重PCR;   (2)若PCR检测阴性,或者PCR不可及,也可应用mNGS技术;   (3)对于病因不明的慢性中枢神经感染或免疫功能缺陷的脑(膜)炎患者,建议首选脑脊液mNGS检测。并建议对mNGS阳性结果通过PCR或者血清学等方法进行验证。   五、其他   (1)加强研发适用于基层医院的病毒性脑(膜)炎检测试剂;   (2)推进研发创新型多重检测试剂;   (3)建立健全病毒性脑(膜)炎监测网络,推进病毒性脑(膜)炎纳入国家疾病监测系统。
  • 《COVID-19并发常见呼吸道病原体感染的患者需要采取预防措施》

    • 来源专题:新发突发疾病(新型冠状病毒肺炎)
    • 编译者:蒋君
    • 发布时间:2020-03-19
    • 本研究进行了一项双中心研究,于2020年1月17日至2月16日在青岛和武汉招募了68例经核酸检测确诊的严重急性呼吸道冠状病毒2(SARS-CoV-2)感染患者。采用间接免疫荧光法检测针对收集的急性期血清中常见呼吸道病原体的特异性IgM抗体。结果:在68例SARS-CoV-2感染患者中,有30例(44.12%)来自青岛。青岛和武汉患者的中位年龄分别为50岁(IQR:37-59)和31岁(IQR:28-38)岁,青岛(60.00%)和武汉(55.26%)的患者多数为女性。青岛市的COVID-19患者中,有24名(80.00%)具有针对至少一种呼吸道病原体的IgM抗体,而武汉市只有一名(2.63%)患者的血清IgM抗体检测呈阳性(P <0.0001) 。在青岛COVID-19患者中检测到的最常见的呼吸道病原体是甲型流感病毒(60.00%)和乙型流感病毒(53.33%),其次是肺炎支原体(23.33%)和嗜肺军团菌(20.00%)。青岛市社区获得性肺炎患者的合并感染模式差异很大,阳性率为20.90%。本文报道了青岛市发生季节性呼吸道病原体共感染的COVID-19患者的比例很大,与武汉地区的差异很大。在流行中心以外与其他呼吸道病原体合并感染的COVID-19患者进行治疗时,需要采取预防措施。强烈建议将SARS-CoV-2添加到有能力的医院的常规诊断测试中,以防止误检测该病毒。