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《酶辅助提取柑橘类水果中的蛋白质和通过使用毛细管凝胶电泳获得的蛋白图谱预测它们的品种》

  • 来源专题：食物与营养
  • 编译者： huangzheng
  • 发布时间：2016-11-09

  • 蛋白质的适宜性资料建立了毛细管凝胶电泳(CGE)作为工具来区分11品种柑橘(橙、橘子皮和果肉是评估工作。CGE分析之前,不同提取缓冲(包括enzyme-assisted治疗)进行比较。最好的结果是通过使用5%(v / v)Celluclast®1.5 L和5%(v / v)Palatase®20000 L缓冲区对柑橘皮和果肉蛋白质提取,分别。由此产生的蛋白获得的资料被用来构造线性判别分析(LDA)模型能够区分柑橘皮和果肉样品根据他们的品种。在这两种情况下,所有的样本正确分类与一个优秀的决议在所有类别,这表明蛋白质模式是一个强大的工具来区分来自不同品种柑橘样品。

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相关报告

  • 《通过谷氨酰胺转移酶治疗酪蛋白源生物活性肽的理化性质和凝胶特性的变化》
    • 来源专题：食物与营养
    • 编译者：niexiuping
    • 发布时间：2018-05-31
    • 酪蛋白源生物活性肽隔离的凝胶行为(CMPI)处理转谷氨酰胺酶1和25 U g−1的蛋白质研究在不同pH值和温度。用三辛钠-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术证实了经谷氨酰胺转移酶对CMPI蛋白组分的交联。交联降低了CMPI的等电点和疏水性。CMPI的凝胶温度从54降至42;在温度扫描测量过程中，在酶处理后，pH 4.5中没有观察到凝胶点(G ' >1 Pa)。与未治疗的CMPI相比，交联CMPI在pH 3.0或4.5时形成了较低刚度和断裂应力的凝胶。然而,CMPI凝胶的硬度和断裂应力形成在70°C的pH值3.0增加了3至4倍,分别通过与25 U g−1蛋白质的交联酶。转谷氨酰胺酶通过CMP和剩余乳清蛋白的交联作用影响CMPI的凝胶化。
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  • 《蛋白质修饰研究的最新篇章》
    • 来源专题：生物安全知识资源中心 | 领域情报网
    • 编译者：hujm
    • 发布时间：2018-10-12
    • 蛋白质修饰的重要性 蛋白质是执行细胞功能的基本功能单元，其表达受基因组和表观遗传学的调控。通常，蛋白质在表达以后还需要经过不同程度的修饰才能发挥所需要的功能。这种翻译后修饰过程受到一系列修饰酶和去修饰酶的严格调控，使得在某一瞬间细胞中蛋白质表现出某种稳定或动态的特定功能。蛋白质翻译后修饰（PTM）通过共价添加官能团或蛋白质，调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解来增加蛋白质组的功能多样性。 这些修饰包括磷酸化，糖基化，亚硝基化，甲基化，乙酰化，脂化和蛋白水解，并且影响正常细胞生物学和发病机理的几乎所有方面。蛋白质磷酸化是迄今为止最常见的PTM，已在大约17，500种人类基因产物中检测到。翻译后修饰是增加蛋白质组多样性的关键机制。尽管基因组仅包含20，000至25，000个基因，但估计蛋白质组包含超过100万个蛋白质。转录和mRNA水平的变化增加了转录组相对于基因组的大小，并且无数的不同翻译后修饰指数增加了蛋白质组相对于转录组和基因组的复杂性。因此，识别和理解PTM对细胞生物学和疾病治疗和预防的研究至关重要。 （蛋白修饰3d示意图） 蛋白质修饰研究进展 基于翻译后修饰蛋白质的不均一性及相对丰度低的特性，翻译后修饰蛋白质的研究主要是利用现有的蛋白质组学技术体系包括电泳、色谱、生物质谱以及生物信息学工具，对修饰蛋白质或肽段进行富集分离，消除修饰引起的不均一性并标记修饰位点，使之与理论质 量有一个差异，通过质谱检测这种差异，从而鉴定蛋白质，并通过串联质谱鉴定修饰位点。PTMs 广泛存在于真核细胞生物中，对生物体的信号传导以及生命活动至关重要，但是 PTMs 鉴定往往比未修饰多肽 鉴定更加困难。 蛋白磷酸化修饰是生物体内最为普遍也是研究最为深入的修饰方式，而其中的酪氨酸磷酸化，特别是酪氨酸激酶受体的磷酸化已经被证明对癌细胞的诱发和生长有关键作用，多种针对不同酪氨酸激酶受体的小分子抑制剂和单克隆抗体也已经被开发成为治疗癌症的一线药物。目前研究较多的蛋白翻译后修饰包括磷酸化、乙酰化、甲基化和泛素化四类修饰。 磷酸化的研究方法及关键技术有：免疫沉淀法、流式细胞分析、双向凝胶电泳法、固相金属亲和色谱等。针对乙酰化主要的研究方法有：生物质谱鉴定乙酰化修饰位点、基于特异性识别乙酰化赖氨酸残基的乙酰化抗体鉴定乙酰化修饰位点、以标记底物为基础的方法鉴定乙酰化修饰位点等。针对甲基化主要的研究方法有：甲基化特异性的 PCR、亚硫酸氢盐测序法、高分辨率熔解曲线法。 而糖基化的研究方法及关键技术有：放射性标记法、分子荧光标记法、电泳法、凝集素标记法、抗体标记法、化学酵素法等。目前所具有的对泛素蛋白探究的技术类型比较单调。对泛素蛋白的检测、泛素作用靶点的定位以及泛素蛋白本身性质的探究方法中，这些技术还必须进行不断的改进和完善。譬如，传统的蛋白质翻译后修饰研究主要依赖于基于特异性抗体的免疫检测技术或放射性标记技术。这些方法对研究由单一位点翻译后修饰介导的细胞信号转导过程起着不可替代的作用。然而，由于上述技术存在操作要求高、特异性抗体制备周期长等缺点，很难实现蛋白质翻译后修饰的大规模检测。
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