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《国产试剂检测结核分枝杆菌对异烟肼、利福平耐药基因临床价值的探讨》

  • 来源专题：结核病防治
  • 编译者： 李阳
  • 发布时间：2017-06-02

  • 《临床肺科杂志》2017年第22卷第6期刊登了一项比较进口试剂和国产试剂在检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼耐药基因差异的研究成果，由徐州市传染病医院的研究人员合作完成。

    研究人员以152株经罗氏培养阳性的菌株为分析对象，分别采用德国Hain life science Gmb H生产的Geno Type MTBDRplus和亚能生物技术（深圳）有限公司生产的基因探针试剂检测利福平、异烟肼耐药基因，并与传统的药敏结果作比较。

    结果显示，152例菌株中有148株纳入比较，其中进口试剂、国产试剂和罗氏培养法对利福平、异烟肼耐药的检出率分别为47.30%（70/148）、43.24%（64/148），50%（74/148）、41.89（62/148），48.65%（72/148）、47.30%（70/148）；国产试剂与进口试剂、罗氏培养法相比，对利福平、异烟肼耐药检出率均无统计学差异（P>0.05）；以罗氏培养的药敏结果为金标准，国产试剂和进口试剂对利福平、异烟肼耐药的检出敏感性和特异性均无统计学差异（P>0.05）。

    综上所述，国产试剂检测异烟肼和利福平耐药的敏感性与特异性与进口试剂相接近，且操作简便、价格便宜，适合基层医院对结核分枝杆菌耐药性的快速检测。

  • 原文来源：http://epub.cnki.net/kns/brief/result.aspx?dbprefix=scdb&action=scdbsearch&db_opt=SCDB;http://epub.cnki.net/kns/brief/result.aspx?dbprefix=scdb&action=scdbsearch&db_opt=SCDB
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  • 《应用PCR-反向点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药突变基因》
    • 来源专题：结核病防治
    • 编译者：李阳
    • 发布时间：2016-10-18
    • PCR-反向点杂交技术是一种将PCR技术的高敏感度、反向斑点杂交技术的高特异性和膜芯片技术的高通量3种优势有效结合起来的快速基因诊断手段，可同时检测4种一线抗结核药物5个常见耐药相关基因上13个位点的突变，简便快速，且可直接采用痰标本进行检测，8小时即可得出结果。基于此，来自江西省胸科医院的研究人员以该院肺结核住院患者痰标本为分析样本，借助PCR-反向点杂交技术对一线抗结核药物（异烟肼、利福平、链霉素及乙胺丁醇）5个常见耐药突变基因上的13个位点进行了检测，用于了解基因突变发生频率及分布特点，并以药敏试验为金标准进行比较，分析其敏感度、特异度、符合率、阳性预测值及阴性预测值等指标，旨在评价其在结核分枝杆菌快速耐药检测中的应用价值，其相关成果发表于《中国防痨杂志》2016年第38卷第8期。 研究共纳入经病原学或病理学证实或符合菌阴肺结核诊断标准的1071例肺结核住院患者（男723例、女348例），且均送检了痰液标本。采用PCR-反向点杂交技术对上述痰标本进行异烟肼（H）、利福平（R）、链霉素（S）及乙胺丁醇（E）耐药基因检测，并以基于痰培养（改良罗氏培养）阳性标本的比例法药敏试验检测结果为金标准来验证基因检测结果的可靠性，进而评价其检测效能。 PCR-反向点杂交检测结果显示，596例结核杆菌阳性（阳性率为55.65％），其中218例（36.58％）检出H、R、S、E耐药基因突变，分布于所测13个位点。此外，根据药物突变位点检出例次占该药物基因突变总检出例次的构成比，发现H、R、S、E最常见突变位点分别位于KatG的315M（82.53％，137/166）、rpoB的S531L（69.50％，98/141）、rpsl的43M（78.65％，70/89）以及embB的306M2（55.13％，43/78）和306M1（39.74％，31/78）。 此外，433例患者标本同时行结核杆菌培养，发现157例培养及PCR-反向点杂交检测均为阳性，其中药敏试验结果显示耐药者74例，H、R、S、E分别耐药45、59、37及19例。以培养及药敏试验结果为金标准，PCR-反向点杂交法对H、R、S、E的耐药检测经Kappa检验具有较好一致性（Kappa值分别为0.77、0.73、0.66、0.49），其中反向点杂交法的敏感度分别为88.89％（40/45)、79.66％（47/59）、67.57％（25/37）、63.16％（12/19）；特异度分别为91.07％（102/112）、91.84％（90/98）、95.00％（114/120）、91.30％（126/138）。 综上所述，PCR-反向点杂交技术用于结核杆菌耐药基因检测具有快速、可靠的优点，对早期临床用药具有指导作用，但限于检测基因的不足，使得诊断敏感度不够高，因而后续还需纳入更多突变基因来开展相关的试验研究。
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  • 《显微镜观察药敏法检测结核分枝杆菌耐药性》
    • 来源专题：结核病防治
    • 编译者：李阳
    • 发布时间：2015-04-22
    • 目的：评价显微镜观察药敏法( microscopic observation drug susceptibility,MODS)检测结核分枝杆菌临床分离株异烟肼( INH)和利福平( RFP)耐药性的可行性。 方法：使用MODS技术对本医院的共201株结核菌临床分离株分别进行INH、RFP的耐药性检测,并与罗氏比例法作比较。 结果：MODS法检测平均时间为8d,以罗氏比例法为金标准,INH的灵敏度和特异性分别为98．5%和100．0%,RFP的灵敏度和特异性分别为99．3%和100%。 结论：MODS法检测结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的耐药性具有成本低、快捷、操作简便、准确等优点,为结核耐药检测提供了一种较好的方法。 信息来源：黄飞，陈俊林，顾德林.显微镜观察药敏法检测结核分枝杆菌耐药性.临床肺科杂志,2015,20(5):801-804.
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