《针对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)受体结合域的新型纳米抗体具有交叉中和活性和抗MERS-CoV的效力》

  • 来源专题:新发突发疾病(新型冠状病毒肺炎)
  • 编译者: 张玢
  • 发布时间:2018-09-03
  • 新出现的中东呼吸综合症冠状病毒(MERS-CoV)持续感染人类和骆驼,国际社会呼吁采用有效、具有成本效益和广谱的策略来控制其传播。纳米抗体(Nbs)是源自骆驼科动物和鲨鱼的单结构域抗体,并且是具有小尺寸和高表达产率的潜在成本有效的抗病毒剂。在这项研究中,研究人员开发了一种新的中和Nb(NbMS10)及其人Fc融合形式(NbMS10-Fc),两者都靶向MERS-CoV刺突蛋白受体结合结构域(RBD)。研究人员进一步测试了它们的受体结合亲和力,识别表位,交叉中和活性,半衰期和针对MERS-CoV感染的功效。两种Nbs均可在酵母中以高产率表达,以高亲和力结合MERS-CoV RBD,并阻断MERS-CoV RBD与MERS-CoV受体的结合。 RBD上Nbs的结合位点被定位为残基Asp539,其是受体结合界面处的保守构象表位的一部分。 NbMS10和NbMS10-Fc对从人和骆驼分离的不同MERS-CoV毒株保持强烈的交叉中和活性。特别是,NbMS10-Fc在体内具有显着延长的半衰期;通过完全保护人源化小鼠免受致命的MERS-CoV攻击,NbMS10-Fc的单剂量处理表??现出高预防和治疗功效。总体而言,该研究证明了生产针对MERS-CoV的成本有效,有效和广谱Nbs的可行性,并且已经产生具有作为抗MERS-CoV疗法的巨大潜力的Nbs。

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    • 编译者:张玢
    • 发布时间:2018-06-16
    • 自2012年以来,中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)已成为人类健康的威胁。研究人员筛选了来自中国南方不同地区收集的至少30种蝙蝠品种的1059个蝙蝠样品,并鉴定了89株谱系Cβ-冠状病毒,包括Tylonycteris pachypus coronavirus HKU4,Pipistrellus pipistrellus冠状病毒HKU5和MERS相关的CoV。我们对来自广东省的晚大蝙蝠Ia io采集的两个阳性样品的全长基因组进行了测序。这两个基因组高度相似,并显示出与其他谱系Cβ-冠状病毒相同的基因组结构。尽管他们与其他MERS相关CoV的全基因组核苷酸同源性仅为75.3%至81.2%,但它们的基因编码区域与其对应物高度相似,除了棘突蛋白质的情况。进一步的蛋白质 - 蛋白质相互作用测定表明这些MERS相关CoV的刺突蛋白与受体DPP4结合。重组分析表明,新发现的MERS相关CoV已经从DPP4识别的蝙蝠冠状病毒HKU4获得它们的刺突基因。研究发现了八种蝙蝠物种中的89种新型谱系Cβ-冠状病毒。提供了来自使用与人类MERS-CoV相同的宿主受体的大蝙蝠的MERS相关CoV的证据。
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    • 来源专题:新发突发疾病(新型冠状病毒肺炎)
    • 发布时间:2015-09-06
    • 有证据表明中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Cov),可引起重度急性呼吸综合征(SARS)样疾病。作为响应措施,开发有效疫苗和治疗方法仍然是临床上的优先工作。为了达到这一目的,有必要评价中和抗体和筛选MERS-Cov进入抑制剂。 此项研究中,我们在Env缺陷表达萤光素酶的HIV-1骨架上制作出一种带有MERS-Cov全长突起(S)蛋白的假病毒。然后我们设计出一种基于假病毒的抑制检测法,用于检测中和抗体和抗MERS-Cov进入抑制剂。 结果发现,结果表明通过生成的MERS-Cov假病毒可以对表达二肽基肽酶-4(DPP4,已经证实的MERS-Cov受体)多种细胞进行单周期感染。与基于活MERS-Cov的抑制检测法的结果一致,将含有MERS-Cov S受体结合域(RBD,残基377-662)(与人IgG Fc融合)的重组蛋白给小鼠接种之后,其抗血清对MERS-Cov假病毒感染产生中和抗体应答。此外,以gp41(ADS-J1)为靶位的一种小分子HIV进入抑制剂和3-羟基苯二甲酸酐修饰的人血清白蛋白(HP-HSA)可以显著抑制MERS-Cov假病毒感染。 由此说明,对于BSL-3活病毒限制,确立的MERS-Cov抑制检测法是一种安全且方便的基于假病毒的替代方法,可用于快速筛选MERS-Cov进入抑制剂,以及评价疫苗诱导产生的,抗高致病性MERS-Cov的中和抗体。 摘自:Virol J. 2013 Aug 26;10:266.