有证据表明中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Cov),可引起重度急性呼吸综合征(SARS)样疾病。作为响应措施,开发有效疫苗和治疗方法仍然是临床上的优先工作。为了达到这一目的,有必要评价中和抗体和筛选MERS-Cov进入抑制剂。
此项研究中,我们在Env缺陷表达萤光素酶的HIV-1骨架上制作出一种带有MERS-Cov全长突起(S)蛋白的假病毒。然后我们设计出一种基于假病毒的抑制检测法,用于检测中和抗体和抗MERS-Cov进入抑制剂。
结果发现,结果表明通过生成的MERS-Cov假病毒可以对表达二肽基肽酶-4(DPP4,已经证实的MERS-Cov受体)多种细胞进行单周期感染。与基于活MERS-Cov的抑制检测法的结果一致,将含有MERS-Cov S受体结合域(RBD,残基377-662)(与人IgG Fc融合)的重组蛋白给小鼠接种之后,其抗血清对MERS-Cov假病毒感染产生中和抗体应答。此外,以gp41(ADS-J1)为靶位的一种小分子HIV进入抑制剂和3-羟基苯二甲酸酐修饰的人血清白蛋白(HP-HSA)可以显著抑制MERS-Cov假病毒感染。
由此说明,对于BSL-3活病毒限制,确立的MERS-Cov抑制检测法是一种安全且方便的基于假病毒的替代方法,可用于快速筛选MERS-Cov进入抑制剂,以及评价疫苗诱导产生的,抗高致病性MERS-Cov的中和抗体。
摘自:Virol J. 2013 Aug 26;10:266.