《基质金属蛋白酶抑制小鼠空洞性肺结核模型悖论恶化病理学》

  • 来源专题:结核病防治
  • 编译者: 蒋君
  • 发布时间:2018-07-02
  • 基质金属蛋白酶(MMPs)降解细胞外基质,与结核(TB)发病机理和空化有关。特别地,MMP-7由缺氧诱导并在结核分枝杆菌感染的C3HeB / FeJ小鼠的肺腔周围高度表达。在这项研究中,我们评估了口服有效的MMP-7抑制剂cipemastat是否可以减少结核分枝杆菌感染的C3HeB / FeJ小鼠肺部空洞。我们证明,与未经治疗的对照相比,cipemastat治疗反而增加了空洞的频率(32% VS. 7%; P = 0.029),免疫病理学和死亡率。因此,需要进一步的研究来了解MMP抑制剂作为肺结核的辅助治疗的作用。

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    • 编译者:李阳
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    • 肺结核空化能够促进人与人间高效的空气传播。基于此,来自伦敦帝国理工学院、瑞典于默奥大学、约翰霍普金斯大学医学院等机构的研究人员以空洞型肺结核兔子模型为分析样本开展了一项转录组学方面的研究,其相关成果于2015年9月27日发表在Journal of Infectious Diseases上。 研究人员在17318个转录因子中鉴定出22种表达上调的蛋白酶,分别是5种过表达的I型胶原酶、组织蛋白酶K(CTSK)、肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-13及MMP-14。通过研究胶原转换标志物[尤其是I型胶原羧基端前肽(CICP)]、尿脱氧吡啶啉(DPD)以及尿螺旋肽,研究人员发现肺结核空化会引起I型胶原的破坏及再合成,且除MMP-1、MMP-13及MMP-14之外的蛋白酶参与了这个过程,表明组织蛋白酶K在其中发挥了关键作用。此外,研究人员通过免疫组化检测揭示了肉芽肿周围表征CTSK的染色,进而证实了人肺标本中CTSK上调的重要性;与对照组相比,肺结核患者血清中CTSK水平升高(3.3 vs 0.3ng/ml,p=0.005)。
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    • 来源专题:战略生物资源
    • 编译者:李康音
    • 发布时间:2024-04-03
    • 2024年3月29日,美国罗格斯新泽西州立大学(Rutgers)药学院副教授王俊及其合作者在Science上发表了题为Design of a SARS-CoV-2 papain-like protease inhibitor with antiviral efficacy in a mouse model的文章。 这篇文章首次报道了在小鼠感染实验中具有抗病毒活性的木瓜样蛋白酶 (papain-like protease, PLpro) 抑制剂。 PLpro 是主蛋白酶外另一个由SARS-CoV-2编码的半胱氨酸蛋白酶。PLpro能够切断病毒非结构多蛋白 (Nsps),对病毒复制起到至关重要的作用。此外,PLpro还能通过裂解宿主蛋白的泛素和修饰干扰素刺激基因15 (ISG 15) 从而抑制宿主免疫反应。PLpro在SARS-CoV-2突变株中高度保守,使其成为备受关注的抗病毒药物靶点。然而,经过药物化学家数十年的结构优化和高通量筛选,PLpro抑制剂开发仍处于临床前阶段。在此之前报道的PLpro抑制剂的抗病毒活性和药代动力学特性都有待优化。 在这项研究中,基于已报道的非共价PLpro抑制剂XR8-24和共价PLpro抑制剂Cp7,将化合物Cp7中的萘环替换成3-苯基噻吩,设计了共价PLpro抑制剂Jun11313 ,发现其可有效抑制PLpro(IC50=0.12 μM),因此研究将其作为起点进行后续结构优化。Jun11313与SARS-CoV-2 PLpro共晶结构分析发现与XR8-24中吡咯烷取代的噻吩基团相比,Jun11313中的噻吩基团朝向BL2 groove结合口袋的相反位置,与Pro248和Pro247形成范德华力相互作用,并与Met208存在CH-π和S-π相互作用。进一步观察PLpro泛素(ubiquitin)与Jun11313的共晶结构,发现噻吩基占据与泛素Val70相同的疏水口袋。因此,研究人员将这个从未被用于PLpro抑制剂设计的口袋称为Val70Ub。 基于Jun11313与PLpro的结合模式,假设可以通过同时靶向BL2 groove和Val70Ub疏水口袋来设计高效的PLpro抑制剂。因此,团队设计并合成了一系列双芳香基取代苯甲酰胺化合物 。所有化合物先进行酶活测试和细胞毒性测试,再通过FlipGFP和SARS-CoV-2抗病毒实验中对部分化合物进行了验证,再利用小鼠的体外微粒体稳定性和体内口服药代动力学(PK)对高效低毒化合物(EC50 ≤ 1 μM,SI > 50)进行了进一步验证。而通过多轮筛选,得到了候选化合物Jun12682。最后,研究发现Jun12682对Omicron、Delta和三种nirmatrelvir耐药病毒株均具有抑制活性。 共晶结构显示Jun12682以及类似物同时结合到BL2 groove和Val70Ub的疏水口袋,验证了初始的理性设计 。在体外PK实验中,Jun12682表现出良好的代谢稳定性(T1/2 = 131.9 min, CLint(mic) = 10.5 μL/min/mg),高选择性和良好的溶解性,同样在体内PK实验中,其具有优异的口服生物利用度(72.8%)。Jun12682对体内五种主要药物代谢的细胞色素P450 (CYP450) 酶都没有抑制效果。这预示着Jun12682不会有跟Paxlovid一样具有药物相互作用的副反应。基于此,团队对Jun12682进行了体内药效研究,结果显示,对SARS-CoV-2感染BALB/c小鼠,Jun12682口服给药不仅显著提高小鼠存活率,而且能够显著降低小鼠肺部病毒滴度和组织损伤,且降低多种炎症因子的表达。 总括而言,基于新发现的Val70Ub的口袋,团队设计了一类结构新颖、高效的PLpro抑制剂,其中,Jun12682不仅能够有效抑制多种突变病毒株,且具有优异的体内活性,具有开发成为新型抗SARS-CoV-2新药的潜力。