《用单细胞分辨率量化小鼠神经系统中共表达的传入AAV基因组数量的新型工具》

• 来源专题：重大疾病防治
• 编译者： 蒋君
• 发布时间：2023-06-05

腺相关病毒（AAV）载体是一种成熟且安全的基因递送工具，用于靶向神经系统。然而，<4.9 kb的有效载荷容量限制了大型或多个基因的转移。超大的有效载荷可以通过将转基因分解成单独的AAV衣壳然后混合来传递。只有在每个转导细胞上实现多个AAV衣壳的受控共表达时，该策略才能提高AAV载货能力，以治疗单基因，多基因疾病和合并症。我们开发了一种工具来量化在神经系统中以单细胞分辨率共表达的传入AAV基因组的数量。通过使用三个AAV的等基因混合物，每个AAV表达单个荧光报告基因，我们确定体外每个神经元表达远大于31个AAV基因组，每个神经元体内每个神经元20个基因组的表达在不同的大脑区域，包括前扣带，前额叶，体细胞运动和躯体感觉皮层区域，以及小脑小叶VI。我们的研究结果表明，包含不同转基因或转基因片段的多个AAV载体可以在同一神经元中有效地共表达。该工具可用于设计和改进基于AAV的神经元回路询问，绘制大脑连接图，并治疗影响神经系统的遗传疾病。