作者:徐雪丽,张伟,刘艳...
摘要:头孢菌素C酰化酶能直接将头孢菌素C(CPC)转化为7-氨基头孢烷酸(7-ACA),此一步酶法具有很大的经济价值,所以得到很多研究者的关注,特别是提高CPC酰化酶活性及专一性的研究.以CPC酰化酶基因ecs50为基础,利用重叠延伸PCR,对文献报道的活性提高的突变体酶S12的6个位点分别进行突变,将得到的6个突变体V122A、G140S、F297N、I314T、I415V、S710L进行诱导纯化后,检测酶活,以此来研究不同突变位点对酶活力的影响.结果V122A的比活为106U/mg,它的转化效率比初始酶提高23.7%.
关键词:CPC酰化酶 重叠延伸PCR 酶活 头孢菌素C 7-氨基头孢烷酸
DOI: 10.13523/j.cb.20150209