2024年4月3日,美国普林斯顿大学Britt Adamson、Lance R. Parsons团队在Nature发表题为Improving prime editing with an endogenous small RNA-binding protein的文章。
在这项研究中,作者们开发了用于评估PE效率的报告系统,并通过全基因组规模的CRISPR干扰筛选(CRISPRi screening),发现了小RNA结合蛋白La(La protein)是PE效率的关键调控因子。
研究发现,La蛋白能够与pegRNA的3'端进行功能性相互作用(能够识别并结合到3'端的poly-U序列),并促进多种编辑策略下的PE效率提高,包括不同类型的碱基替换、插入和缺失。作者进一步开发了一种新的PE系统--PE7,它将La蛋白的RNA结合N端结构域融合到了PE系统中。PE7在使用表达pegRNA、工程化pegRNA(epegRNA)以及优化了La结合的合成pegRNA情况下均能提高编辑效率。
PE7编辑器在提高疾病相关基因位点的编辑效率方面表现出色,包括与镰状细胞病、朊病毒疾病、家族性高胆固醇血症等相关的基因。研究还探讨了PE7编辑器在原代人类细胞(如T细胞和造血干细胞)中的应用潜力,并证实了其在这些细胞类型中也能提高PE的效率。