2013年的马肉丑闻表明，发展分析方法来准确识别和量化肉类中牛肉和马肉的成分具有重要意义。在这项研究中，我们成功地筛选了牛和马的特异性核DNA序列，分别用于检测肉糜中牛肉和马肉的部分。对53种牛、马特异性核DNA序列设计的引物和试样进行了分析，并通过PCR方法对23种引物和试样的特异性进行了评价。在44个不同的牛或马个体上进行了引物和试样结合区的保守性试验。常规和实时PCR检测限(limit of detection, 简称LOD)是0.05ng，定量限(limit of quantification, 简称LOQ)降至5%。实时PCR证实，牛和马的特异性核DNA序列在基因组中以固定的拷贝数存在。建立了一种多重PCR方法对牛(223个bp)、马(197个bp)和参比(129个bp)在同一反应中进行有效鉴别。在5种牛马DNA二元混合物中建立并证实了多重实时PCR反应，具有足够的真实性参数（r.e.≤9.35%）和精密度参数（r.s.d.≤8.88%）。进一步验证了该方法在实际肉制品检测中具有良好的应用前景。本研究的方法和策略将对打击掺假和维护公平市场发挥重要作用。
