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《通过过表达JcARF19基因来提高小桐子果实产量的方法》

  • 来源专题：生物科技领域知识集成服务
  • 编译者： 陈方
  • 发布时间：2020-04-08

  • CN107760708B 通过过表达JcARF19基因来提高小桐子果实产量的方法
    专利申请人：中国科学院微生物研究所
    本发明公开了一种通过遗传改良的方法提高小桐子果实产量的方法，包括如下步骤：①构建表达小桐子ARF19基因的农杆菌转化载体；②利用步骤①构建的农杆菌转化载体转化农杆菌菌株，然后再用筛选得到的重组农杆菌菌株转化小桐子的外植体，并再生小桐子的幼苗，筛选并培育稳定过表达ARF19基因的小桐子幼苗，得到具有提高的小桐子果实产量的小桐子植株。转基因小桐子的JcARF19基因的表达水平提高，表现出早花、多分枝、增大种子和增加种子数目等性状。除了小桐子，JcARF19的异源植物表达也可以实现单株种子产量的增加。采用本发明方法，可将小桐子单株产量提高到3～5倍。

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    • 编译者：陈方
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    • 2019年11月11日《自然-生物技术》报道，由美国北卡罗来纳大学、国立卫生研究院等多个机构组成的研究团队开发了一种使用CRISPR技术来实现基因表达剂量依赖性激活的方法。该方法适用于要求剂量依赖性激活基因表达的各种情况。 先前的研究表明，使用CRISPR/Cas9基因编辑技术可以抑制或激活基因表达。但直到目前，还没有在不使用外源转录调节蛋白的情况下实现激活剂量依赖性基因表达的工具。这次，研究人员找到了一种新方法，利用专门设计的化学表观遗传修饰剂（chemical epigenetic modifiers，CEM），通过招募内源的转录调控因子，从而实现目标基因的剂量依赖性的表达激活，消除了对外源转录激活因子的依赖。 新方法依赖于两个组件：一个是由Cas9与FKBP（FK506-binding protein）形成的无活性复合体，另一个是由FK506制成的CEM，包括CEM87、CEM88和CEM114，这些分子分别与不同的转录激活因子相结合。 研究人员利用绿色荧光蛋白（GFP）基因转染了HEK293T细胞，并对共表达gRNA和dCas9机制的细胞开展流式分析。他们用共表达dCas9-FKBP以及CEMa分子的质粒激活报告基因。在48小时后，他们发现GFP报告基因的表达均有显著增强。事实上，CEM可以上调靶基因的内源性基因表达高达20倍或更多。实验还证明了转录激活的剂量依赖性控制、在多个不同基因上的作用、CEM活性的可逆性以及最佳的CEM在整个基因组中的特异性。 研究者表示，理论上可以通过设计gRNA靶向基因组中的任何基因。由于该基因激活平台以剂量依赖的方式进行化学激活，因此它将有助于在更大的浓度范围内研究表型和基因表达量之间的互动关系，有助于解答与疾病机理相关的问题，为靶向疾病相关的基因开辟新道路。
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  • 《通过过量表达fdxN，提高了sphaeroides HY01的产氢性能》
    • 来源专题：可再生能源
    • 编译者：pengh
    • 发布时间：2018-08-06
    • fdxN基因编码的铁氧还蛋白I (FdI)被证明是产生氢的氮化酶的主要电子供体。在本研究中，fdxN基因在突变体MHY01中进行过表达，将fdxN基因插入到Rhodobacter sphaeroides HY01基因组的hupSL区域构建。对其光发酵H2生产性能进行了研究。结果表明，与野生型HY01相比，MHY01 (hupSL::fdxN)中fdxN和硝化酶活性的表达水平分别提高了177%和61.7%。以25 mM乙酸盐和34 mM丁酸盐为碳源，6 mM L -glutamate为氮源，最大H2产率为156.1 mL/(L·h)，比HY01增加50.7%。MHY01在接种量分别为5%、10%和15%的情况下，与HY01相比，MHY01的最大H2产率分别提高了30.0%、52.5%和50.7%。结果表明，过表达fdxN可以提高紫色非硫菌的硝化酶活性和H2的生产性能。铁氧还蛋白I的丰度可能会限制与生物制氢过程相关的电子传递通量的效率。 ——文章发布于2018年8月4日
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