海参抗炎肽高通量鉴定工作流程的建立
2024年11月2日，中国海洋大学薛长湖院士团队Bingxue Jiang及通讯作者Yanchao Wang在国际期刊《Food Research International》（JCR一区，IF2023=7.4）发表了题为“Establishment of a workflow for high-throughput identification of anti-inflammatory peptides from sea cucumbers”（ 海参抗炎肽高通量鉴定工作流程的建立）的研究论文。
摘要
本研究建立了一个高效的工作流程，用于从海参中筛选抗炎肽，通过虚拟筛选锁定海参的主要卵黄蛋白作为抗炎肽的前体蛋白。研究利用酶解和肽组学分析，识别出170种肽，其中12种被确认为具有较高可信度的抗炎活性。进一步的细胞实验显示，三种抗炎肽有效抑制RAW264.7细胞中NO的产生和促炎细胞因子的释放。分子对接表明，这些肽通过与COX-2和iNOS的活性位点结合发挥抗炎作用，为开发新的抗炎肽和海参生物活性成分的高值利用提供了参考。
引言
慢性炎症与多种疾病（如关节炎、糖尿病、炎症性肠病等）密切相关，目前的抗炎药物使用往往伴随副作用，因此天然抗炎成分的研究成为热门方向。食源性活性肽因其安全性和高生物利用度被认为是功能性食品和营养品的理想成分。海参因具有丰富的生物活性，包括免疫增强和抗炎效果而备受关注，但其抗炎肽的筛选流程尚待优化。本研究旨在通过整合虚拟筛选和肽组学等技术，建立一种高效的抗炎肽筛选方法。
研究内容
（1）蛋白筛选与酶解：使用三种蛋白酶（胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶）水解海参主要卵黄蛋白，基于预测的抗炎活性筛选潜在的抗炎肽。酶解后通过超滤和肽组学分析筛选出不同分子量的肽段。
（2）抗氧化活性测试：抗氧化性作为初筛指标，通过DPPH自由基清除率测定海参蛋白水解物的抗氧化活性，筛选出活性较强的水解物用于后续的抗炎肽分析。
（3）细胞抗炎实验：在RAW264.7巨噬细胞中测试筛选出的高可信度肽的抗炎效果，发现三种肽能显著抑制NO的产生和促炎细胞因子的分泌。
（4）分子对接分析：通过分子对接评估肽与COX-2和iNOS的结合能力，结果表明这些肽与COX-2和iNOS的活性位点形成稳定的结合，显示出良好的抗炎潜力。
结论与展望
本研究成功建立了基于虚拟筛选和肽组学的高通量抗炎肽筛选流程，筛选出的海参卵黄蛋白抗炎肽在细胞模型中表现出显著的抗炎效果。未来研究可以进一步优化该流程，用于其他海洋资源的生物活性肽开发，以期推动抗炎功能食品和医药的应用。
图文赏析
原文链接：
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0963996924012419?via%3Dihub
