《表达猪繁殖与呼吸综合征病毒糖蛋白5的植物乳杆菌表达系统的构建和优化》

  • 来源专题:实验室生物安全
  • 编译者: 张虎
  • 发布时间:2019-12-07
  • 猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)会导致猪严重的生殖衰竭和呼吸系统疾病。尽管开发了许多针对该病毒的疫苗,但许可疫苗显示出有限的功效。在这里,我们描述了PRRSV GP5基因的植物乳杆菌表达系统的构建和优化。野生型截短的GP5或密码子优化的截短的GP5分别在基因的5'和3'末端与内源性信号肽和靶标肽(DCpep或Mpep)连接。然后,将片段克隆到植物乳杆菌表达质粒pSIP411中,并在SppIP的诱导下表达。结果,具有优化密码子的PRRSV GP5基因具有比具有野生型密码子的GP5基因更高的表达,这表明密码子优化是增强植物乳杆菌中外源基因表达的有效途径。进一步的分析表明,带有内源性信号肽的密码子优化的GP5可以有效地展示在植物乳杆菌的表面,而带有目标肽Mpep的GP5则显示出最高的抗原性。在以下条件下获得了最高的PRRSV GP5产量:在33°C下用200µng / mL SppIP诱导了携带质粒pSIP-1320-O5MH的植物乳杆菌(L. plantarum)诱导7°h。

  • 原文来源:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/31805333
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    • 编译者:季雪婧
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