在蛋白质中，盐桥影响蛋白质的功能及理化性质，如酶的催化、蛋白质 - 蛋白质相互作用、蛋白质 -DNA/RNA相互作用、分子识别等，但是盐桥形成机制目前还不清楚。青岛能源所仿真模拟团队利用该团队优化的 pH滴定方法，测量了 GB3中 4 对盐桥在不同温度条件下盐桥的强度，并阐明了盐桥形成的机制。研究发现，蛋白质盐桥会随着温度的升高而增强，通过范德霍夫方程( - 2.303Dp K a = DH /R T -DS /R）拟合得到 D H 和 D S ， D H> 0 和 D S> 0，表明熵驱动了盐桥的形成，而焓变不利于盐桥的形成。随后，研究人员采用分子动力学模拟方法计算了盐桥自由能随温度的变化，结果和实验结论一致。计算研究表明，去溶剂化熵对盐桥的形成起到了主导作用，即盐桥的形成导致了原本围绕在离子周围的水分子被释放，从而增加了溶剂的熵值。
