禽流感病毒（AIV）可以跨越物种屏障感染人类和其他哺乳动物。然而，由于宿主的限制，这些物种的交叉传播通常是死胡同。目前关于宿主细胞膜（microRNAs）限制性作用的研究主要集中在宿主细胞膜（microRNAs）是否起到限制作用。本研究以猪肺泡巨噬细胞（PAM）细胞为模型，探讨miRNAs在宿主范围限制中的作用。在AIV感染过程中，在PAM细胞中筛选出40个表达失调的mirna。其中，ssc-miR-221-3p和ssc-miR-222两种猪源性mirna可直接靶向病毒基因组，通过抑制抗凋亡蛋白HMBOX1的表达诱导细胞凋亡，从而抑制PAM细胞中AIV的感染和复制。禽流感病毒引起PAM细胞ssc-miR-221-3p和ssc-miR-222的上调表达。我们进一步发现NF-κbp65在AIV感染时更有效地磷酸化，P65作为转录激活因子调节AIV诱导的miR-221-3p/222的表达。重要的是，我们发现ssc-miR-221-3p和ssc-miR-222也能在AIV感染新生猪气管上皮（NPTr）细胞中特异性上调，并具有抗AIV的作用。综上所述，我们的研究表明miRNAs在甲型流感病毒的跨物种感染中起着宿主屏障的作用。
