《用十二烷基硫酸钠处理后使用碘化单酰胺的活的和死的大肠杆菌细胞的鉴别》

  • 来源专题:食物与营养
  • 编译者: lixiaoman
  • 发布时间:2016-08-06
  • 在此研究中,我们评估和改进 利用PMA qPCR 模拟热杀菌技术在食品工业中的使用的微生物模型的有效性。测定包括一个基于文化的方法和 PMA qPCR 的传统技术致病性大肠杆菌的热诱导衰减。在 90 ° C 为 35 设定温度热处理后 s,量化差异,观察平板计数和 PMA qPCR 之间。通过两次处理 PMA 抑制细胞 DNA 从死中大肠杆菌悬液对PMA qPCR 方法进行了改进。此外,PMA 治疗,是用于进一步开发的 PMA qPCR 检测活大肠杆菌效力前十二烷基硫酸钠 (SDS) 治疗细胞悬浮液。因此,在这项研究建立了双 PMA 和 SDS 热处理组合新颖作为一项战略,提高效率的 PMA qPCR。总之,我们评估和改进食源性致病菌使用我们的研究中建立的微生物模型判别活的和死细胞 PMA qPCR 法。

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  • 《用大肠杆菌制成的利维坦聚合物刷可以将细菌拒之门外》

    • 来源专题:纳米科技
    • 编译者:郭文姣
    • 发布时间:2020-01-14
    • 实验室里从细菌中提取的一种酶引发了一场巨大的聚合物刷的发明,这是一种具有生物相容性的材料,有可能击退传染性细菌。 聚合物刷的表面通常覆盖着由聚合物制成的纳米级刷毛,是化学合成的类似意大利面的分子链。但在一项新的研究中,佐治亚理工学院的研究人员领导的一个小组偶然发现了一种生物技术,可以通过将刷毛长到平常长度的100倍来改进刷毛。 “我们把酶表面上观察了一个完全不同的实验,但我们把太多表面上太密集,最后——繁荣——我们最厚的,最长的聚合物刷我们见过或听说过,”詹妮弗·柯蒂斯说,这项研究的副教授在乔治亚理工学院的物理学。“它们是如此之大,你甚至可以在光学显微镜下看到它们,而不必用原子力显微镜或其他常用的聚合物刷方法来感受它们。” 研究人员将注意力从最初的研究转移到研究这支大得出奇的新刷子上。 对于侵入它们的细菌来说,毛刷的刷毛几乎是密密麻麻的密林,让微生物无法进入实验室观察。它阻碍了生物膜的传播,这些菌落聚集在一起形成一种坚硬的物质,使杀死细菌变得困难。 生物膜的堡垒 “人类免疫系统很难对付生物膜。抗生素对它们也不起作用。在水过滤中,生物膜也能顽强地附着。如果你在表面有透明质酸刷,生物膜就无法附着在上面。”柯蒂斯说。 透明质酸是一种多糖,是一种糖分子链,自然地广泛存在于我们的细胞内和周围。它也被许多人从它在化妆品保湿霜中的使用中知道。 刷子上透明质酸刷毛的酶是透明质酸合成酶,它通过毫不费力地挤出极长的刷毛来绕过更繁琐的化学合成。当刷毛脱落时,酶也可以代替它们,这是化学合成的刷毛做不到的,这就限制了这些刷毛的耐久性。尽管如此,使用合成酶仍然是不正统的。 “人们说,‘这些酶在这里做什么?“因为他们在寻找化学物质,而生物学家想知道这把刷子和生物学有什么关系,”柯蒂斯说。 该团队于2019年12月在《自然通讯》杂志上发表了一项新研究,名为“自我再生巨型透明质酸聚合物刷”。这项研究是由国家科学基金会资助的。 工程大肠杆菌 研究人员通过将等相似链球菌的透明质酸合成酶基因插入大肠杆菌,然后收获这种酶,从而使细菌大量生产这种酶。 柯蒂斯说:“我们把细菌打碎成一堆没有生命的黏稠碎片,然后把它们的膜粘在表面上,合成酶把刷子挤出来。” 酶可以开关,调节刷子周围溶液的盐浓度或pH值,可以使刷毛伸直或卷曲成可缩回的形状。抗菌剂等功能性添加剂可以嵌入刷子中。 可以想象,有一天,像导管这样的东西可以涂上一层刷子,以保持无菌状态,而且,摆动的刷子的厚度也可以起到润滑剂的作用,防止与下面的表面发生摩擦。一些在愈合过程中起关键作用的人类细胞实际上能够穿透刷毛,这可能具有医学潜力。 柯蒂斯说:“对于无法愈合的慢性伤口,你可以设计一种绷带,既能促进新细胞生长,又能将细菌拒之门外。” 生物物理学研究 研究人员偶然进入了这个巨大的刷子,这为他们最初的研究目的提供了更多的可能性。 柯蒂斯说:“我们经常要处理生物化学、化学信号和力学之间的耦合,所以有一些东西可以把力学和信号分离开来,这样我们就可以把注意力集中在力学上,这是非常有用的。” ——文章发布于2020年1月13日
  • 《Nature | 招募T细胞抗柠檬酸杆菌的结肠细胞》

    • 来源专题:战略生物资源
    • 编译者:李康音
    • 发布时间:2024-04-14
    • 2024年4月10日,阿拉巴马大学伯明翰分校Casey T. Weaver、Carlene L. Zindl共同通讯在Nature发表题为Distal colonocytes targeted by C. rodentium recruit T-cell help for barrier defence的文章 ,阐明了特定肠上皮细胞(IEC)亚群和T细胞相互作用在防御鼠柠檬酸杆菌(Cr)感染中的关键作用,而这是一种了解人类肠道致病性感染的小鼠模型。作者发现IL-22在维持肠道屏障的完整性和协调抵抗Cr入侵结肠隐窝的免疫反应方面发挥着关键作用。 研究表明,中远端结肠内一个独特的吸收IEC亚群是Cr感染的主要目标。这些结肠细胞对IL-22信号表现出不同的反应性,这对抑制Cr的侵袭能力至关重要。值得注意的是,这些细胞表达的主要组织相容性复合体II类(MHCII)对于触发Cr特异性T细胞更长的IL-22信号传导至关重要,这突出了MHCII介导的抗原呈递在招募T细胞中的重要性。Cr感染后,结肠增生发生,其特征是隐窝延长,未分化的隐窝基柱状干细胞和转运扩增细胞扩张。这种反应是区域性的,分化的结肠细胞(DCC)发生了实质性的变化。虽然一些DCC表现出促衰老的迹象,但其他DCC转化为“病原体诱导的簇细胞”(P-ICC),表达IL-22可诱导的防御基因,并通过快速成熟和增强免疫活性在宿主防御中发挥关键作用。 值得注意的是,DCC是Cr定殖的首选生态位,与作为人类肠道致病性大肠杆菌感染位点的回肠肠上皮细胞形成对比。尽管细菌粘附素(如intimin亚型和宿主受体)的变化可能是物种和组织特异性取向的基础,控制Cr和其他A/E肠道病原体的附着和定植偏好的具体机制尚待完全阐明。在免疫反应分层方面,DCC和有丝分裂后结肠细胞(PCC)对IL-22刺激表现出不同的反应。PCC不是Cr直接靶向的,它不会像Reg3家族中的那些一样显著上调某些抗菌肽基因,这表明它在病原体耐药性中起着间接作用。相反,DCC对IL-22的反应更为强烈,上调了负责产生如结合细菌铁载体并限制铁有效性的脂运载蛋白-2(Lcn2),以及阻碍细菌金属离子摄取的钙卫蛋白(S100a8/9)的基因。此外,DCC释放趋化因子,如CXCL2和CXCL5,以招募中性粒细胞,从而增强局部抗菌活性。 该研究表明,表达MHCII的DCC与T细胞存在共生关系,以维持保护性IL-22信号传导,这对于将Cr限制在结肠中远端并防止更深地侵入隐窝是必要的。这一发现强调了MHCII依赖性T细胞辅助在协调肠道上皮内免疫保护方面的重要性。此外,研究结果表明,DCC代表了一个独特的吸收IEC谱系,能够适应结肠中远端环境,能够对共生微生物群做出反应,并可能通过金属离子螯合调节屏障功能。 总之,这项工作强调了特定的结肠细胞亚群和T细胞之间复杂的相互作用,使其对柠檬酸杆菌产生有效的免疫反应。这项研究将DCC定位为对抗Cr感染的核心参与者,并强调了MHCII驱动的T细胞支持在维持肠道屏障完整性和对抗肠道病原体方面的必要性。DCC和PCC对IL-22的不同反应性为旨在增强针对胃肠道特定区域的免疫防御的潜在治疗策略提供了有价值的见解。