《22种诊断马流感H3N8亚型病毒的快速抗原检测(RAD)方法评价》

  • 来源专题:新发突发疾病防治
  • 编译者: 张玢
  • 发布时间:2015-11-16
  • 马流感(EI)是H3N8亚型病毒引起的一种高度传染性疾病。为了减少疾病传播 ,马流感的快速诊断是必要的。许多快速抗原检测(RAD)用于诊断人类流感,但他们诊断EI的能力尚未得到系统的评估。研究人员比较了22种RAD测试诊断EI的性能。EI病毒进行5倍连续稀释用于测定22种RAD试验检测的极限,四个最敏感的RAD试验 (ImmunoAce Flu, BD Flu examan, Quick chaser Flu A, B 和 ESPLINE Influenza A&B-N) 进一步使用实验和自然感染的马匹咽部采集的样品进行评估,这些结果与分子检测获得的结果进行了比较。22种RAD测试方法的检测极限变异很大,四种显示最佳的灵敏度RAD试验分别为比分子测试的125倍。使用比分子技术的RAD测试病毒检测中的实验感染马的持续时间短27%,并从自然感染马73%的实时RT-PCR阳性样品检测的RAD测试。这项研究表明选择正确的RAD测试,只有三种适合诊断EI。即使是RAD测试,灵敏度最高只能作为一种辅助手段,因为假阴性结果的潜在的分子检测。

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  • 《对甲型流感病毒亚型有效的合成DNA疫苗》

    • 来源专题:生物安全知识资源中心 | 领域情报网
    • 编译者:hujm
    • 发布时间:2018-09-14
    • 目前可用于预防季节性流感病毒感染的疫苗具有有限的诱导针对多种H3N2病毒的免疫力的能力,所述H3N2病毒是近年来导致高发病率和死亡率的甲型流感病毒亚型。 现在,Wistar科学家已经设计出一种合成DNA疫苗,可以对这些H3N2病毒产生广泛的免疫反应。研究结果在线发表在人类基因治疗杂志上。 最近2013/2014年,2014/2015年和2017/201年度的严重流感季节可直接归因于H3N2。2017/2018年针对H3N2的商业疫苗效力较低,并导致更高的肺炎和流感相关死亡率。 “目前用于满足H3N2病毒抗原多样性的疫苗设计和制造具有挑战性,随着另一个流感季节临近,仍然迫切需要新的流感疫苗方法,”首席研究员David B. Weiner博士说。 Wistar研究所疫苗和免疫治疗中心副主席兼主任,以及WW Smith慈善信托基金会癌症研究教授。“还需要改进对新出现的病毒株的快速选择和部署,合成DNA疫苗是实现这一目标的重要工具。” 为了克服H3N2病毒的抗原多样性,Weiner及其同事使用了从流感研究数据库检索的1968年至今的H3N2菌株,以产生四种合成的血凝素抗原(HA)的常见序列,一种存在于病毒表面的蛋白质。这些微共有序列用于产生四种DNA疫苗,将它们共混以产生标记为pH3HA的鸡尾酒疫苗。科学家们在两周后给小鼠和加强疫苗接种疫苗或安慰剂。加强注射后两周,他们用两种代表性的流感病毒接种它们。 Weiner实验室的高级博士后研究员Sarah Elliot及其同事在感染后两周监测临床症状,体重和存活率。用合成DNA疫苗免疫的所有小鼠都产生针对HA的广泛,强大的抗体应答和有效的细胞免疫应答,包括CD4和CD8T细胞应答。 它们受到来自两种不同攻击H3N2病毒的致死性甲型流感病毒感染的保护。用pH3HA疫苗接种诱导针对1968年大流行H3N2的强抗体以及现代H3N2菌株,其是2015/2016和2017/2018的市售疫苗的组分。 与接受安慰剂的患者相比,免疫小鼠在鼻内病毒攻击后存活10倍的半数致死剂量; 安慰剂组在接触攻击病毒后六天内死于感染。 “pH3HA疫苗代表了一种独特的微观共识方法,可以产生针对抗原相关的多种季节性甲型H3N2病毒的免疫反应,”Weiner说。“这种方法的首要目标是限制可用于预防新型H3N2病毒的疫苗重组数量。”
  • 《新测试快速诊断寨卡病毒》

    • 来源专题:可再生能源
    • 编译者:pengh
    • 发布时间:2017-09-29
    • 麻省理工学院的研究人员开发了一种基于纸张的测试,可以在20分钟内诊断寨卡病毒感染。与现有的检测不同,新诊断并没有与登革热病毒发生交叉反应。登革热病毒是寨卡病毒的近亲,在许多寨卡病毒检测中可能会产生假阳性。 在寨卡病毒和登革热流行的国家,这种检测方法可以提供一种易于使用、廉价和便携的诊断方法,而在血液中检测病毒RNA的黄金标准检测方法是不可用的。 “有一个单独的测试可以区分登革热和寨卡病毒的四种血清型,这很重要,因为它们是相互传播的。它们是由同一只蚊子传播的,”波士顿马萨诸塞大学的工程学副教授、麻省理工学院机械工程系的访问科学家、该论文的共同资深作者金伯利哈姆德-希弗里利说。 研究人员与世界各地的科学家合作,在患者样本上测试这一新设备,并确认它能准确地将寨卡病毒与相关病毒区分开来。 Lee Gehrke是麻省理工学院医学工程与科学研究所(IMES)的赫尔曼。冯。霍尔姆霍兹教授,也是这项研究的资深作者,该研究发表在9月27日的科学转化医学杂志上。这篇论文的第一个作者是IMES的研究科学家艾琳博斯和机械工程博士后海伦娜德Puig。 没有更多的假阳性 诊断寨卡病毒的最大挑战之一是,许多测试都是基于与一种名为NS1的病毒蛋白相互作用的抗体,这种蛋白在被感染患者的血液中发现。不幸的是,来自同一家族的许多其他病毒,也就是flavi病毒,都有类似的NS1,并且会产生假阳性。黄病毒包括西尼罗河病毒和引起黄热病的病毒,以及登革热病毒。 为了建立更精确的诊断方法,麻省理工学院的研究小组开始寻找能够与寨卡病毒产生的NS1蛋白质相互作用的抗体,以及从这四种不同的登革热病毒株中分别获得NS1的抗体。 为了达到这一目标,研究人员将小鼠暴露在寨卡病毒和登革热病毒中,然后对产生的抗体进行配对,以对抗每一种黄病毒版本的NS1蛋白质。这使得他们能够识别出只有一个版本的NS1的抗体,而不是其他的抗体。 “我们从信息学的分析中得知,如果我们看得足够多,并且我们梳理了这些动物的B细胞,我们最终会发现这些抗体,”博斯说。“我们能够梳理出所有能让你在检测中独一无二的抗体。” 研究人员使用这两对分别进行了5个单独的测试,分别针对每种病毒。他们用一种抗体从每一对中涂上一种抗体,而第二种抗体则附着在黄金纳米颗粒上。在将患者的血液样本添加到这些纳米颗粒的溶液中后,纸条就被浸入溶液中。如果目标NS1蛋白存在,它就会附着在纸条上的抗体和纳米粒子结合抗体上,在20分钟内就会出现一个彩色的斑点。 这种方法需要每个样本的5条测试条来检测每一种病毒,但是研究人员现在正在研究一个版本,该版本将对所有5个样本进行测试。 大多数寨卡病毒和登革热流行的国家不允许患者样本被运出该国,因此研究人员前往包括墨西哥、哥伦比亚、印度和巴西在内的几个国家,用患者样本检测他们的设备。 他们发现,他们的研究结果与聚合酶链反应(PCR)测试的结果相当,后者在血液中检测病毒RNA。在发现寨卡病毒的地区,PCR检测并没有得到广泛应用,因为它们需要经过培训的人员和实验室设备,而这些设备在任何地方都是不可用的。 “由于传统方法需要大量的样本收集和诊断,这便宜,纸质,快速诊断将许多传染性疾病的诊断非常有用,”卢克Lee说,副总统的新加坡国立大学和生物医学研究所主任在新加坡全球卫生研究和技术。 新兴的病毒 登革热每年感染数亿人,主要是在热带地区。这通常不是致命的,但在有不止一种血清型的地区,它更有可能产生一种严重的、可能危及生命的疾病。一种能够区分所有四种血清型登革热的诊断方法,可以让医生在早期发现一种新的血清型进入他们的区域。 “当我们前往这些病毒存在问题的地方时,那里的人们一致表示,他们需要更多的监控。他们需要知道哪些病毒在他们的环境中传播,”Gehrke说。 研究人员相信,他们的方法也能让他们快速开发出针对未来可能出现的其他相关病毒的诊断测试。 “通过筛选我们对抗所有这些抗原的抗体,就像西尼罗河病毒一样,我们已经知道它们的反应有多好。因此,这是我们未来可以使用的信息,开发更多的测试,可以用来检测其他新兴病毒。”Gehrke说。 他们现在正在研究一种新型的“波萨”病毒的诊断方法,这种病毒的传播与莱姆病的传播相同。Powassan主要在美国东北部和五大湖地区发现了一种严重的脑炎。 这项研究是由美国公共卫生服务和哥伦比亚科学技术创新基金资助的。 ——文章发布于2017年9月27日