背景:
EPHB4(肝配蛋白受体B4)和rasa 1(p120 Ras GTP酶激活蛋白)是淋巴管(LV)瓣膜发育所必需的。然而，EPHB4和RASA1是如何精确调节左心室瓣膜发育的还不清楚。在这项研究中，我们研究了EPHB4和RASA1调节左心室瓣膜发育的机制。
方法:
我们使用LV特异性诱导型EPHB4缺陷小鼠和EPHB4敲入小鼠，它们表达一种不能结合RASA1但保留蛋白酪氨酸激酶活性的EPHB4(Eph B4 2YP ),研究Eph B4和RASA1在胚胎LV瓣膜发育和成人LV瓣膜维持中的作用。我们还在体外使用人真皮淋巴管内皮细胞来研究EPHB4和RASA1作为振荡剪切应力诱导的LV瓣膜规范的调节剂的作用，振荡剪切应力被认为是体内LV瓣膜规范的触发因素。
结果:
由于诱发左心室EPHB4丢失，左心室瓣膜规范、继续瓣膜开发后规范和左心室瓣膜维护被阻止。EPHB4 2YP小鼠的左心室瓣膜规格和维持也受损。通过抑制Ras-MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)信号通路，可以逆转左心室瓣膜发育的缺陷。在人类真皮淋巴管内皮细胞中，EPHB4或其ephrin b2配体的表达缺失、RASA1的表达缺失以及EPHB4和RASA1之间物理相互作用的抑制导致失调的振荡剪切应力诱导的Ras-MAPK激活和LV特异性标记物的表达受损，这些标记物可以通过Ras-MAPK途径抑制来挽救。当用压电1振荡剪切应力传感器的Yoda1激动剂刺激人真皮淋巴管内皮细胞时，观察到相同的结果。尽管当给予野生型胚胎时，Yoda1增加了LV瓣膜的数量，但当给予EPHB4 2YP胚胎时，它没有增加LV瓣膜的数量。
结论:
EPHB4是LV阀门规范、后续阀门开发后规范和阀门维护所必需的。LV瓣膜规格需要EPHB4和RASA1之间的物理相互作用来限制淋巴管内皮细胞中Ras-MAPK途径的激活。具体来说，EPHB4-RASA1物理相互作用对于抑制通过压电1振荡剪切应力传感器诱导的Ras-MAPK激活是必要的。这些发现揭示了EPHB4和RASA1调节左心室瓣膜发育的机制。
