逆向遗传学已经成为必不可少的工具，彻底改变了我们对病毒发病机理和疫苗开发的见解。大型RNA病毒基因组（例如冠状病毒），由于大小和偶尔的不稳定性，很难在大肠杆菌宿主中进行克隆和操纵，因此，RNA病毒的另一种快速而强大的反向遗传学平台将使研究界受益。在这里，我们展示了基于酵母的合成基因组学平台的完整功能，可用于多种RNA病毒的基因重建，包括冠状病毒科、黄病毒科和副粘病毒科的成员。使用病毒分离物，克隆的病毒DNA、临床样品或合成DNA生成病毒亚基因组片段，并使用转化相关重组（TAR）克隆在酿酒酵母中一步组装，以将基因组维持为酵母人工染色体（YAC）。 T7-RNA聚合酶已被用于产生传染性RNA，然后被用于拯救活病毒。基于该平台，我们能够在收到合成DNA片段后仅一周的时间内，对最近流行的SARS-CoV-2的化学合成克隆进行工程改造和复活。我们在此描述的技术进步可对爆发的病毒快速做出反应，因为它可以在爆发期间实时实时生成不断发展的RNA病毒变体并对其功能进行表征。
