利用聚合酶链反应(PCR)技术评价食品加工对转基因水稻TT51-1检测和定量的影响，我们采用常规PCR、定量实时PCR(qPCR)、液滴数字PCR(ddPCR)等方法，具有标准或验证的引物和探针对不同加工阶段米饼中TT51-1组分的含量进行了监测。在常规PCR中，相对较长的扩增靶点，如苏云金芽孢杆菌（Bt）基因（301bp）和事件特异性靶点（274bp），在烘烤、油炸或微波样品中几乎未检测到。在qPCR中，在煮沸、干燥、烘焙和微波处理样品中检测到扩增荧光信号，但在油炸样品中几乎没有观察到。常规PCR采用与qPCR相同的引物在所有样本中检测到相应的短靶点。常规PCR结果与qPCR结果基本一致。结果表明，食品加工直接影响转基因成分的检测，建议选择相对较短的片段作为该类分析的扩增目标。我们建立了定量检测TT51-1的qPCR和双链ddPCR方法。正交试验结果表明，TT51-1/PLD双链ddPCR的最佳条件是引物/探针的500/250?nM结合58°C退火温度。两种方法均可用于加工食品中TT51-1的定量检测，双链ddPCR方法具有稳定性、准确性、PCR抑制剂抗性以及不需要参考物质等优点，是检测加工食品中转基因成分的一种更有吸引力的方法。
