《水培环境下的oleraceae基因毒性评价研究.(槟榔科)果油,在哺乳动物体内细胞》

  • 来源专题:食物与营养
  • 编译者: lixiaoman
  • 发布时间:2016-05-30
  • E.甘蓝是亚马逊地区的一种热带植物,作为食品、水果的一种抗氧化剂,用于消炎,降低胆固醇,动脉粥样硬化性疾病,并具有抗癌特性。果油具有止泻、抗炎和镇痛的功能,但没有相关的遗传毒性评价研究。因此,本研究的目的是评价E—甘蓝果油潜在的遗传毒性。实验对象是大鼠的细胞。通过一定的实验表明,在研究的实验剂量下,生物细胞无明显的毒性作用。这些结果表明,在本实验的条件下,在大鼠细胞中未发现E—甘蓝果油的遗传毒性。

相关报告
  • 《Cell丨用合理设计的 R2 反转座子在哺乳动物细胞中进行全 RNA 介导的定向基因整合》

    • 编译者:李康音
    • 发布时间:2024-07-12
    • 2024年7月8日,中国科学院动物研究所/北京干细胞与再生医学研究院李伟研究员与周琪研究员团队合作在Cell杂志以长文形式在线发表了题为All-RNA-mediated Targeted Gene Integration in Mammalian Cells with Rationally Engineered R2 Retrotransposons的研究论文。该研究结合基因组数据挖掘和大分子工程改造等手段,开发了使用RNA供体进行大片段基因精准写入的R2逆转座子工具,能够在多种哺乳动物细胞系、原代细胞中实现大片段基因(>1.5 kb)高效精准的整合,最高效率超过60%,成功实现了全RNA介导的功能基因(DNA)在多种哺乳动物基因组的精准写入,为新一代创新基因疗法的发展提供了基础。 在该研究中,研究团队首先通过数据挖掘,全面系统地分析了自然界中R2逆转座子元件的生物多样性;通过构建基于RNA供体的基因写入的报告体系,成功筛选出在哺乳动物细胞中具有完整GFP功能基因整合活性的R2Tg系统(来源于一种鸟Taeniopygia guttata 的基因组)。随后,研究团队针对R2Tg系统发挥功能所必需的两个关键组分:R2蛋白质以及供体RNA,进行了系统性的功能探索与工程化改造,最终获得了在人细胞系中基因整合效率超过20%的en-R2Tg工具。 由于R2蛋白质可以通过mRNA表达,且供体RNA本身也是RNA,那么,en-R2Tg工具能否以全RNA形式介导的基因的高效精准写入?为了探究这一点,研究人员通过体外合成获得了编码R2蛋白质mRNA以及供体RNA,并使用脂质体递送的方式将两条mRNA导入人的细胞中。结果显示,en-R2Tg工具能够高效整合多个与疾病治疗相关基因,且这些基因能够有效表达功能蛋白。能够以全RNA的形式发挥功能,意味着en-R2Tg工具可以使用安全性已经在临床上得到证明的LNP纳米材料来进行递送,这将有可能解决长久以来基因写入工具依赖病毒载体进行高效递送的难题。研究团队发现,使用LNP递送en-R2Tg工具在人的肝脏细胞系中能够实现25%的基因整合效率。此外,研究团队还证明R2工具在人类原代细胞中同样具有活性;同时,通过显微注射将en-R2Tg工具导入小鼠胚胎,成功实现了超过60%的GFP基因定点整合效率。 该研究的另一关键点在于,工程化改造的en-R2Tg工具是否还保留有天然R2逆转座子的28S rDNA位点特异性整合这一性质?为了回答这一问题,研究人员结合无偏好的基因整合富集高通量测序以及全基因组三代测序方法,发现en-R2Tg工具在全基因组范围内展现了极高的基因整合特异性,大于99%的外源基因都精准整合到28S rDNA安全港位点。同时,结合qRT-PCR以及RNA-Seq实验,研究人员发现en-R2Tg工具对细胞的转录组状态几乎没有影响。这说明 en-R2Tg 介导的基因写入是位点精准特异的,可以有效避免逆转录病毒等技术所产生的基因随机整合导致的基因突变风险。 综上,该研究基于自然界存在的R2逆转座系统,结合数据分析和工程化改造方法,成功开发了全RNA介导的、高效精准的基因写入技术,首次在多种人和小鼠细胞系及原代细胞中实现了功能基因的定点整合。R2基因精准写入工具在递送和安全性方面具有显著优势,未来有望基于此工具开发在体功能基因回补写入以及在体生成CAR-T细胞等全新的疾病治疗方法。值得注意的是,R2基因写入技术目前无法实现在不同基因组位点的可编程写入,且在人原代细胞中的基因写入效率较低,因此未来需要进一步发展和优化。
  • 《银纳米粒子和银离子对哺乳动物和植物细胞的影响》

    • 来源专题:食物与营养
    • 编译者:lixiaoman
    • 发布时间:2016-08-30
    • 纳米银颗粒(AgNPs)是最常使用的纳米材料。在我们的实验中,我们测试了AgNPs(27纳米)工艺生产的情形。物理化学法(TEM,DLS,原子力显微镜和分光光度法)被用来AgNPs进行表征和成像。AgNPs和银离子在两个实验模型下研究的影响(植物和哺乳动物细胞)。通过人角质形成细胞(svk14)和小鼠成纤维细胞(NIH3T3)细胞系的选择来评价细胞毒性和遗传毒性对哺乳动物细胞的影响。观察比svk14 和NIH3T3细胞高灵敏度银和银离子。在NIH3T3细胞的细胞核中积累AGNPS,引起DNA损伤和增加了凋亡细胞和坏死细胞的数目。三种Solanum spp(S.番茄品种。业余爱好者,美国chmielewskii、S. habrochaites)分别测试AGNPS和银离子在植物细胞的细胞毒性。过氧化物酶活性和脂质过氧化的S基因型 与AgNPs的记录治疗后的最高价值。ROS水平升高可能观察到损坏的膜在S基因的原因。我们发现,纳米银颗粒的细胞毒性和遗传毒性不仅取决于纳米粒子的特性,还取决于采用AgNPs型的细胞。